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影响因子:5.738 期刊 :Frontiers in Oncology 合作技术:RNA pull down MS、RNA免疫沉淀(RIP)、LC-MS/MS质谱检测
2021年7月,中南大学湘雅三医院肿瘤科在知名期刊《Frontiers in Oncology》发表了高分文章,辉骏生物为该合作客户提供RNA pull down MS、RNA免疫沉淀(RIP)、LC-MS/MS质谱检测等技术支持.10年实验服务外包经验,精通RNA pull-down MS,RNA pull-down Wb实验流程,协助客户顺利发文,RNA Pull Down实验结果稳定
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影响因子:4.831 期刊 :Aging-US 合作技术:载体构建
2020年7月,中山大学附属第六医院的研究人员发现:ILF3-AS1在颞叶癫痫(TLE)患者的海马和血清中水平升高,ILF3-AS1通过靶向miR-212诱导炎性细胞因子和MMP3、MMP9的表达。值得注意的是,针对ILF3-AS1/miR212/MMP3/9轴的治疗策略可能是治疗TLE的有效方法。
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影响因子:4.379 期刊 :Scientific Reports 合作技术:DNA pull down MS
2021年8月,西南大学家蚕基因组学国家重点实验室发表新研究成果。本研究聚焦调控丝素蛋白(fibH、fibL、P25)编码基因的启动子结合蛋白,利用DNA pull down MS技术筛选了幼虫第四次蜕皮期 (M4)和5龄幼虫第5天(L5D5)这两个具有代表性的发育阶段,从后丝腺中鉴定出大量fih、fibL和P25启动子的结合蛋白,并分析了M4和L5D5之间存在共同和独特结合蛋白,及它们的功能特征和相互作用关系,为了解丝蛋白基因的相关调节因子提供了新的见解。
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影响因子:4.362 期刊 :Oncol Res 合作技术:慢病毒载体构建,慢病毒包装,稳转细胞株构建
2020年7月,广州医科大学的这项研究首次探讨了Maff在HCC中的作用,并揭示了一个新的circ-ITCH/miR-224-5p/MafF调控通路。研究发现Maff在肝癌组织和细胞中呈下降趋势,慢病毒介导的Maff过表达抑制肝癌细胞增殖,诱导细胞凋亡。RNA pull down实验表明,CIRC-itch能特异性地结合肝癌组织中的miR-224-5p;救治实验进一步阐明Maff的表达和抗肿瘤作用可能是通过CIRC-itch/miR-224-5p轴来调节的。研究证实了Maff在肝癌中的抑癌作用,为肝癌的潜在治疗靶点提供了新的视角。
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影响因子:14.3 期刊 :Advanced Science 合作技术:生物素RNA pull-down试剂盒和F2-RNA pull-down试剂盒
2025年6月,皖南医学院第一附属医院的研究人员使用辉骏生物生物素RNA pull-down试剂盒和F2-RNA pull down试剂盒发表文章,该研究发现:lncRNA PDIA3P1在食管鳞状细胞癌(ESCC)中高表达,通过与miR-152-3p竞争结合,阻止GLUT1 mRNA的降解来增强其水平,并破坏MARCH8和HK2之间的结合,以减少HK2的泛素化降解,促进糖酵解。PDIA3P1还上调了组蛋白H4K8乳酰化(H4K81a)的水平并促进BMP7转录,最终推动ESCC进展。WTAP介导的m6A修饰通过IGF2BP1依赖性识别增强了PDIA3P1的稳定性
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在 COIP 实验中,磁珠结块是一个令科研人员颇为头疼的问题,不仅会影响蛋白结合效率,导致实验结果重复性差,还可能使大量时间和精力付诸东流。辉骏生物ChainFree® 纳米抗体磁珠在 COIP 实验中表现卓越,磁珠粒径均匀,确保实验结果的均一性与稳定性,能够精准地富集目标蛋白 - 蛋白复合物,减少非特异性结合,让WB条带更清晰。同时,在蛋白质纯化领域,可高效分离出高纯度的目标蛋白,满足科研及生物制药等多方面需求。
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IP(免疫沉淀),是指利用抗体来沉淀目标蛋白,并同时沉淀它的结合伙伴(可以是蛋白、DNA片段或者RNA),以确定它们之间的相互作用关系。
Co-IP、RIP、ChIP三种实验在操作流程上有所不同,但原理和实验设计是一致的。辉骏生物以沉淀结合蛋白为例,讲解IP实验的组别设计,并标注了IP结果的各个条带所代表的含义。
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辉骏生物的ChainFree®标签纳米抗体磁珠(Flag、HA、V5、GFP、mCherry),除了彻底解决轻重链污染问题,经序列改造的 ChainFree® 纳米抗体对靶蛋白亲和力提升 3-5 倍,具有更高的亲和力,单次实验仅需 5μl-20μl 即可实现高效免疫沉淀。小剂量高回报:减少抗体用量的同时,降低非特异性结合,实验成本直降 50%!
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蛋白质间相互作用是其发挥功能的主要模式,蛋白质通过结合不同的伙伴来行驶不同功能,形成复杂的信号网络。免疫共沉淀(Co-IP)、pull down、荧光共定位等都是最常见的蛋白互作研究方法。辉骏生物的合作伙伴——中山大学肿瘤中心华南肿瘤学国家重点实验室在Cancer Research(1区,IF=12.5)上发表的论文,就同时采用了Co-IP和GST pull down方法,研究了糖原合成酶2(GYS2)在乙肝病毒相关性肝癌中的机制。
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RNA pulldown探针制备先确定目标序列,根据实验目的确定合适的RNA序列,可以是目标转录本的全部序列或部分序列,对照组通常采用反义序列,也可以是无关序列.如果目标序列小于100bp,建议直接合成带标记的RNA,如果大于100bp,可按照辉骏生物提供的步骤体外转录获得.为解决RNA探针标记的难题,辉骏生物研发了一种新的标记方法,利用一段只有16nt的RNA标签“F2”来标记RNA,100%标记,操作简单,成本低
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RNA pulldown用于检测RNA-蛋白质、或RNA-RNA之间相互作用的技术,其基本原理是:利用带标签的目标RNA探针与待测蛋白质或RNA进行体外或体内结合,通过亲和作用将复合物分离出来,之后采用Western Blot、质谱技术检测结合蛋白或采用qPCR、测序技术检测结合RNA。辉骏生物研发了一种新的标记方法,利用一段只有16nt的RNA标签“F2”来标记RNA,再采用与F2具有强大亲和力的配体磁珠捕获互作复合体。这种标记方法可用于标记各种类型的RNA(lnRNA、mRNA、circRNA、pre-miRNA或pri-miRNA),操作简单、成本低。
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难道没有完全无污染的抗体beads吗?当然有!结合多年的互作实验和质谱经验,辉骏生物开发了专门解决轻重链污染问题的ChainFree®标签抗体磁珠,涵盖了目前主流的多种标签,比如Flag、HA、Myc、V5、GFP、mCherry。该磁珠上偶联了经过严格筛选、优化并重组表达的无轻、重链的标签抗体,完全解决了抗体污染问题