货号 | 规格 | 货期 | 价格 |
FI88703 | 10次 | 现货 | |
FI88704 | 20次 | 现货 |
RNA pull-down是检测RNA及其结合蛋白(RNA binding protein,RBP)之间相互作用的主要实验手段之一。生物素-RNA pull down试剂盒利用体外转录的生物素标记RNA来模拟天然RNA分子,作为探针,与样本裂解液孵育,探针与裂解液中的蛋白形成RNA-蛋白质复合物;通过链霉亲和素磁珠与生物素之间的强亲和力,特异性捕获生物素标记的RNA,从而实现RNA结合蛋白(RBPs)的捕获富集;之后可以采用Western Blot技术检测特定蛋白,也可以采用质谱(LC-MS/MS)技术鉴定未知蛋白。
RNA结合蛋白(RBPs)是一类功能强大而广泛的调节因子,约占细胞编码的所有蛋白的5%-10%。除了少数RNA以核酶形式单独发挥功能,大部分RNA通过与蛋白结合形成RNA-蛋白复合物来发挥作用。一方面,RBP参与RNA调控,另一方面,RNA也会调控RBPs。以下列举了可应用F2-RNA pull down试剂盒的几个研究方向:
1. RNA活性、转运、定位调控;
2. RNA稳定性、翻译和降解;
3. RNA合成、可变剪切;
4. RNA修饰;
5. RBPs的活性、定位或与其他蛋白质相互作用。
试剂名称 | 体积 | 保存条件 |
链霉亲和素磁珠 | 500 μL | 4 ℃ |
RNA结构缓冲液 | 600 μL | 4 ℃ |
裂解缓冲液 | 5mL | 4 ℃ |
NT2缓冲液 | 25mL | 4 ℃ |
漂洗液 | 50mL | 4 ℃ |
洗脱缓冲液 | 600 μL | -20 ℃ |
生物素RNA pull down试剂盒 * 产品优势
2、适用范围广:优化的裂解液配方适用于动物、植物、真菌等各类型细胞或组织样本。
3、适配下游检测:竞争洗脱效率高,蛋白无需变性,更有利于蛋白的质谱检测;
4、技术应用成熟、广泛。
1. 扩增带有T7启动子的目标序列,并以此为模板制备生物素标记的RNA探针;
2. 链霉亲和素磁珠与目标RNA探针孵育;
3. 与待测蛋白液孵育,调取目标RNA的结合蛋白。
RNA pull down预测结合蛋白的western-blot检测图
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