货号 | 规格 | 货期 | 价格 |
FI88701 | 10次 | 现货 | |
FI88702 | 20次 | 现货 |
辉骏生物自主研发的 F2-RNA pull-down 试剂盒(专利号:ZL202111160837.9),利用一段只有16nt的RNA标签“F2”与目标RNA连接,通过固定在磁珠上的特异性配体与F2标签的强亲和力,高效调取目标RNA,同时捕获与之结合的蛋白;之后可以采用Western Blot技术检测特定蛋白,也可以采用质谱(LC-MS/MS)技术鉴定未知蛋白。
辉骏生物FII-RNA pull down试剂盒和方法及其应用专利证书
RNA结合蛋白(RBPs)是一类功能强大而广泛的调节因子,约占细胞编码的所有蛋白的5%-10%。除了少数RNA以核酶形式单独发挥功能,大部分RNA通过与蛋白结合形成RNA-蛋白复合物来发挥作用。一方面,RBP参与RNA调控,另一方面,RNA也会调控RBPs。以下列举了可应用F2-RNA pull down试剂盒的几个研究方向:
1. RNA活性、转运、定位调控;
2. RNA稳定性、翻译和降解;
3. RNA合成、可变剪切;
4. RNA修饰;
5. RBPs的活性、定位或与其他蛋白质相互作用。
试剂名称 | 体积 | 保存条件 |
链霉亲和素磁珠 | 500 μL | 4 ℃ |
配体 | 250 μL | -20 ℃ |
RNA结构缓冲液 | 600 μL | 4 ℃ |
裂解缓冲液 | 5mL | 4 ℃ |
NT2缓冲液 | 25mL | 4 ℃ |
漂洗液 | 50mL | 4 ℃ |
洗脱缓冲液 | 600 μL | -20 ℃ |
1、F2标签是一段RNA序列,可以连接和标记各种类型的RNA(如circRNA);
2、F2标签很短,只有16nt,几乎不影响目标RNA的结构或功能;
3、可以用于体内或体外标记目标RNA;
4、F2标签与其特异性配体具有很强亲和力,能够高效调取F2-RNA及其结合蛋白。
RNA pull down试剂盒产品对比表
F2-RNA pull down试剂盒 | 生物素-RNA pull down试剂盒 | |
标记方法 | 通过PCR法连接目标RNA | 体外转录时将生物素UTP掺入目标RNA |
标记效率 | 100% | 随RNA长度增加而降低 |
标记类型 | 体内和体外标记均可 | 体外标记 |
标记RNA类型 | 各类RNA | 只能标记线性RNA |
实验成本 | 需要额外购买RNA体外转录试剂盒 | 需要额外购买RNA体外转录试剂盒、生物素UTP mix、RNA纯化试剂盒 |
实验难度 | 操作简单 | 步骤多,对初学者不友好 |
1. 体外转录或体内表达获得目标RNA-F2;
2. 利用磁珠上的特异性配体捕获目标RNA-F2;
3. 与待测蛋白液孵育,调取目标RNA的结合蛋白。
左:RNA pull down WB检测图(阳性); 右:RNA pull down MS产物银染图
RNA pull down MS质谱检索表格(部分展示)
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