DNA Pull-down试剂盒简介

DNA pull down是检测DNA及其结合蛋白之间相互作用的主要实验手段之一，通常用来分析与目标基因调控区域相结合的转录因子及其他调控蛋白。DNA pull-down试剂盒采用链霉亲和素磁珠来高效调取生物素标记的目标DNA序列及其结合蛋白。首先针对目标区域制备生物素化的 DNA 探针，之后利用链霉亲和素磁珠捕获目标DNA探针，再与待测样本核蛋白孵育，洗涤去除未结合的蛋白，即可得到“目标DNA探针-蛋白质”复合物，这种互作复合物既可以用Western blot检测已知蛋白，也可以用质谱（LC-MS/MS）鉴定未知蛋白。

DNA Pull-down试剂盒应用

DNA pull-down以感兴趣的DNA序列为中心，寻找与该序列结合的蛋白质，最常见的应用是寻找某特定基因启动子区域的转录因子。转录因子是一种DNA结合蛋白，它能够与真核基因的顺式作用元件（如启动子、增强子等）特异性结合来激活或抑制基因表达。以下列举了可应用DNA pulldown试剂盒的几个研究方向：

1、特定基因的转录因子筛选研究

2、转录因子靶向结合特定基因的验证研究

3、转录因子结合定位或与其他蛋白质相互作用

4、DNA修饰结合修饰酶、去修饰酶及读取酶研究

DNA pull down试剂盒-辉骏生物产品优势

1、调取效率高：链霉亲和素磁珠和生物素具有强大的亲和力，且磁珠背景噪音低，特异性强。
2、适用范围广：优化的裂解液配方适用于动物、植物、真菌等各类型细胞或组织样本。

3、适配下游检测：竞争洗脱效率高，蛋白无需变性，更有利于蛋白的质谱检测；
4、操作简便，实验周期短，适合初学者。

DNA pull-down试剂盒组分（12次）

试剂名称	体积（12 Tests）	保存条件
链霉亲和素磁珠	500 μL	4 ℃
裂解缓冲液	7 mL	4 ℃
NT2缓冲液	16 mL	4 ℃
漂洗液	32 mL	4 ℃
洗脱缓冲液	500 μL	-20 ℃
蛋白酶抑制剂	230 μL	-20 ℃

DNA pulldown试剂盒使用流程简述

1. 提取细胞核蛋白；

2. 根据目标DNA序列制备生物素标记的探针；

3. 利用链霉亲和素磁珠捕获生物素化的DNA探针；

4. DNA探针与待测核蛋白液孵育，调取目标DNA的结合蛋白。

DNA pull down检测试剂盒使用案例

辉骏生物DNA pull down检测试剂盒使用案例

DNA pull down预测结合蛋白的western-blot检测图

DNA pull down试剂盒-客户文献

1. Ni P.Y. et al: YBX1-Mediated DNA Methylation-Dependent SHANK3 Expression in PBMCs and Developing Cortical Interneurons in Schizophrenia. Advanced Science. 2023. IF=17.521.

2. Chen R. et al: Lnc-GD2H Promotes Proliferation by Forming a Feedback Loop With c-Myc and Enhances Differentiation Through Interacting With NACA to Upregulate Myog in C2C12 Myoblasts. Front Cell Dev Biol. 2021, IF=6.684.

3. Ma Y. et al: New insights into the proteins interacting with the promoters of silkworm fibroin genes. Scientific Reports. 2021, IF=4.379.

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