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服务介绍

基因表达稳转株构建(转座子系统)技术原理


转座子(transposons)是基因组中的“跳跃者”,能够作为独立的单位从基因组的一个位置移动到另一个位置,也被称为“跳跃基因”。按照转座机制的不同,可分为反转录转座子和 DNA 转座子两类。


DNA转座子(DNA transposons)通过“剪切-粘贴”机制进行,包括转座酶表达、移动、插入三个阶段。转座酶识别转座子两端的末端重复序列(ITRs),将转座子从原来的位置解离下来,再重新整合到基因组上。


目前在脊椎动物中应用最多的三大转座子是:PiggyBac(PB)、睡美人Sleeping Beauty(SB)和Tol2。


辉骏生物利用PiggyBac转座子系统进行基因表达稳转株的构建,通过对转座子系统质粒的精心优化,使得转座效率更高,能够实现外源基因(尤其是大片段基因)的高水平表达,该技术可以替代慢病毒感染法,用于快速构建稳转细胞株,其特点是:低成本、高效率、可插入大片段基因、基因表达稳定。


基因表达稳转株构建技术原理图-辉骏生物低成本/高效率/可插入大片段基因.png




基因表达稳转株构建(转座子系统)技术优势


1

piggyBac载体装载量大,在5’TR和3’TR之间能携带长达27 kb的DNA,可用于大片段目的基因的表达

2

通过酶促反应插入目的基因,整合效率远高于DNA随机插入效率


3

目的基因表达稳定,可以稳定表达传代20代


4

比病毒系统安全性更高

5

不需要进行慢病毒包装等步骤,实验周期短



联系技术支持 
18927549347、13430303037





基因表达稳转株构建(转座子系统)实验流程图


基因表达稳转株构建(转座子系统)实验流程-辉骏生物.png




基因表达稳转株构建(转座子系统) * 辉骏服务内容


服务内容

交付内容

周期

价格

1. 预实验:

细胞检测:细胞转导测试、抗性筛选测试、基因本底检测



1、过表达稳转细胞株:2个T25瓶(10^6 次方/瓶)
2、空载对照细胞株:2个T25瓶(10^6 次方/瓶)
3、结题报告:质粒构建、细胞筛选、表达检测等操作和结果



6-9周



点击询价


 2. 正式实验:

 PiggyBac载体构建、电转细胞、抗性筛选、RT-qPCR表达检测、细胞扩大培   养和保存




基因表达稳转株构建 * 辉骏服务优势


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效果保障,不成功不收费

无效全额退款,100%保证目标基因编辑/表达效果

效率保障

快至6周即可交付合格细胞株,高效实验流程

售后保障

实验疑问随时快速响应,专业技术团队全程跟进



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