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IP / Pull down Beads一抗分子互作试剂盒分子互作单品基因表达产品二抗
[FI8303] 链霉亲和素磁珠
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  链霉亲和素磁珠

  FI8303-1mL  4℃(避免冻存),2年


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  链霉亲和素磁珠  FI8303-5mL  4℃(避免冻存),2年


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链霉亲和素磁珠产品信息


辉骏生物的链霉亲和素磁珠(Streptavidin Magnetic Beads) 采用蛋白偶联技术将链霉亲和素(SA) 共价偶联到超顺磁性微球表面, 可高效地结合生物素化的抗体、核酸、蛋白等配体分子,以及游离生物素。本产品使用简单, 可保证批次一致性和结果的可重复性




链霉亲和素磁珠产品属性


粒径1 µm
磁珠浓度10 mg/mL
生物素化单链寡核苷酸(24nt)结合量

≥ 350 pmol/mg

生物素化IgG结合量
≥ 15 µg/mg
应用相互作用研究(RNA pull-down,DNA pull-down,生物素药物pull-down)、免疫检测、分离核酸等




链霉亲和素磁珠使用案例


(1) Input:样本裂解液;  (2)  IgG:normal IgG的IP产物(对照组);   (3)  Anti-Bait:诱饵蛋白抗体的IP产物(实验组)。




链霉亲和素磁珠使用方法(参考)

 
1. 结合生物素化核酸
(1)将磁珠瓶置于漩涡振荡器上 20 s,振荡重悬磁珠; 取 100 µL 磁珠到新的离心管中,放磁力架上静置 1 min 并弃上清

(2)加入 1 mL Wash BufferⅠ 到离心管中,充分振荡重悬磁珠,放磁力架上静置 1 min 并弃上清;重复洗涤磁珠一次,共两次。
(3)加入 500 µL 的用 Wash BufferⅠ 稀释的生物素化核酸(使磁珠浓度为 2 mg/mL),充分振荡重悬磁珠; 将离心管置于旋转混匀仪上,室温旋转混合 30 min

(4)放磁力架上静置 1 min,将上清液转移至新的离心管。

(5)按步骤 (2) 的方法洗涤磁珠三次。

(6根据后续实验的要求,加入合适的低盐缓冲液,重悬磁珠。


2. 结合生物素化抗体/蛋白操作流程
(1)  将磁珠瓶置于漩涡振荡器上 20 s,振荡重悬磁珠; 取 100 µL 磁珠到新的离心管中,放磁力架上静置 1 min 并弃上清
(2)  加入 1 mL Wash Buffer Ⅱ 到离心管中,充分振荡重悬磁珠。 放磁力架上静置 1 min 并弃上清重复洗涤磁珠两次,共洗涤三次。 
(3)  加入 1 mL Wash Buffer Ⅱ 稀释的生物素化抗体/蛋白(使磁珠浓度为 1 mg/mL),充分振荡重悬磁珠。将离心管置于旋转混匀仪上,室温旋转混合 60 min
(4)  放磁力架上静置 1 min,将上清液转移至新的离心管。

(5) 按步骤 (2) 的方法洗涤磁珠五次

(6根据后续实验的要求,加入 Wash Buffer Ⅱ 或其他合适的缓冲液,重悬磁珠。


3. 洗脱
(1)  生物素标记核酸的洗脱: 向磁珠中加入 50-100 µL Elution BufferⅠ, 65℃孵育 5 min 90℃孵育 2 min; 放磁力架上静置 1 min,收集上清
(2)  生物素标记抗体/蛋白的洗脱:有以下两种洗脱方案,操作者可根据后期检测的需要选择不同的洗脱方法:

a. 变性洗脱法:洗脱的样品适用于 SDS-PAGE 检测。向磁珠中加入 50~100 µL 1 × SDS-PAGE Loading Buffer混合均匀, 95℃ 加热 5 分钟。置于磁力架,分离磁珠,收集上清,进行 SDS-PAGE 检测。
b. 非变性洗脱法:此方法洗脱的样品保持原有的生物活性, 便于后续检测(例如 SDS-PAGEWestern-blot、质谱实验等) 。向磁珠中 50~100 µL Elution Buffer Ⅱ,室温孵育 5~10 min。 放磁力架上静置 1 min,收集上清至新的 EP 管,并立即滴入总体积 1/10 体积的中和缓冲液(0.1 M NaOH) ,将洗脱产物 pH 调节至中性。



注意事项


1.  本产品仅限于科学研究使用,不得用于临床诊断或治疗。
2.  为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。


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