GST pull-down试剂盒和His pull-down试剂盒简介

辉骏生物的GST pull-down试剂盒和His pull down试剂盒能够高效调取GST融合蛋白或His融合蛋白在各类样本中的互作蛋白。

在GST pull-down或His pull down实验前，先通过基因工程技术手段将目标基因连入带有GST标签或His标签的原核表达载体中，并导入大肠杆菌中进行原核表达。之后，GST融合蛋白通过GTH（ Glutathione）树脂纯化，His融合蛋白通过Ni-NTA 树脂纯化。最后，加入样本裂解液孵育，样本中与GST或His融合蛋白有相互作用的蛋白便可被吸附而分离。分离的蛋白产物既可以用Western blot检测已知蛋白，也可以用质谱（LC-MS/MS）鉴定未知蛋白。

蛋白pull-down试剂盒应用

蛋白-蛋白间的相互作用是蛋白质发挥生物学功能的主要模式，蛋白质会通过结合不同的伙伴来行驶不同的功能，形成复杂的信号转导网络。以下列举了可应用蛋白 pull down试剂盒的几个研究方向或研究领域：

1. 确定2个蛋白是否具有直接相互作用；

2. 确定蛋白之间结合的结构域；

3. 病毒、细菌等病原体侵染宿主细胞的机制；

4. 酶和底物的作用机制；

5. 蛋白调控复合体的研究。

GST pull down和His pull down试剂盒组分

试剂名称	体积（20 Tests）	体积（40 Tests）	保存条件
GST标签纯化树脂/His标签纯化树脂	950 μL	1.9 mL	4 ℃
裂解缓冲液	24 mL	48 mL	4 ℃
漂洗液	70 mL	140 mL	4 ℃
洗脱缓冲液	1.1 mL	2.2 mL	4 ℃
蛋白酶抑制剂	600 μL	1.2 mL	-20 ℃

蛋白Pull down试剂盒优势

1、调取效率高：融合蛋白与树脂亲和力强，可以高效纯化目标蛋白及其互作蛋白；

2、适用范围广：优化的裂解液配方适用于动物、植物组织、微生物等各类型组织和细胞样本；

3、洗脱液适配后续Western Blot及质谱（LC-MS/MS）实验。

4、操作简便，耗时短，适用于初学者。

pulldown试剂盒使用流程简述

1. 通过原核表达系统表达带有GST标签或His标签的融合蛋白；

2. 在细菌上清液中加入GST标签亲和纯化树脂或His标签亲和纯化树脂，4 ℃孵育2 小时；

3. 将待测样本裂解液加入上述体系中，4 ℃孵育过夜；

4. 漂洗、洗脱得到目标蛋白及其互作蛋白复合物。

GST pulldown和His pulldown试剂盒使用案例

GST pull down试验服务结果分析-辉骏生物

GST pull down WB结果图（阳性）

His pull down WB结果图-辉骏生物.jpg

His pull down WB结果图（阳性）

GST Pull-down MS：Western blot检测图

GST pull down试剂盒厂家-大量现货-辉骏生物

蛋白pull-down MS：质谱检索表格（部分展示）

蛋白pull down试剂盒—客户文章

1. Chen S.L. et al: A GYS2/p53 Negative Feedback Loop Restricts Tumor Growth in HBV-Related Hepatocellular Carcinoma. 2018. Cancer Research. 1区, IF=11.2.

2. Lin J.M. et al: A positive feedback loop between ZEB2 and ACSL4 regulates lipid metabolism to promote breast cancer metastasis. 2023. eLife. 1区, IF=8.3.

3. Yu C.P. et al: Flot2 acts as a novel mediator of podocyte injury in proteinuric kidney disease. 2023. Int J Biol Sci. 2区, IF=9.2.

4. You H. J. et al: Hepatitis B virus X protein promotes vimentin expression via LIM and SH3 domain protein 1 to facilitate epithelial-mesenchymal transition and hepatocarcinogenesis. Cell. 2021. Commun Signal. 2区, IF=8.4.