货号 | 规格 | 货期 | 价格 |
FI8804-12T | 12次 | 现货 | |
FI8804-24T | 24次 | 现货 |
辉骏生物的GST
pull-down试剂盒能够高效调取GST融合蛋白在各类样本中的互作蛋白。在GST
pull-down实验前,先通过基因工程技术手段将目标基因连入带有GST标签的原核表达载体中,并导入大肠杆菌中进行原核表达。之后,GST融合蛋白通过GTH(
Glutathione)树脂纯化。最后,加入样本裂解液孵育,样本中与GST融合蛋白有相互作用的蛋白便可被吸附而分离。分离的蛋白产物既可以用Western blot检测已知蛋白,也可以用质谱(LC-MS/MS)鉴定未知蛋白。
蛋白-蛋白间的相互作用是蛋白质发挥生物学功能的主要模式,蛋白质会通过结合不同的伙伴来行驶不同的功能,形成复杂的信号转导网络。以下列举了可应用GST pull down试剂盒的几个研究方向或研究领域:
1. 确定2个蛋白是否具有直接相互作用;
2. 确定蛋白之间结合的结构域;
3. 病毒、细菌等病原体侵染宿主细胞的机制;
4. 酶和底物的作用机制;
5. 蛋白调控复合体的研究。
试剂名称 | 体积(12 Tests) | 保存条件 |
GST标签纯化树脂 | 550 μL | 4 ℃ |
裂解缓冲液 | 14 mL | 4 ℃ |
漂洗液 | 45 mL | 4 ℃ |
洗脱缓冲液 | 650 μL | 4 ℃ |
蛋白酶抑制剂 | 350 μL | -20 ℃ |
1、调取效率高:GST融合蛋白与树脂亲和力强,可以高效纯化目标蛋白及其互作蛋白;
2、适用范围广:优化的裂解液配方适用于动物、植物组织、微生物等各类型组织和细胞样本;
3、洗脱液适配后续Western Blot及质谱(LC-MS/MS)实验。
4、操作简便,耗时短,适用于初学者。
1. 通过原核表达系统表达带有GST标签的融合蛋白;
2. 在细菌上清液中加入GST标签亲和纯化树脂,4 ℃孵育2 小时;
3. 将待测样本裂解液加入上述体系中,4 ℃孵育过夜;
4. 漂洗、洗脱得到目标蛋白及其互作蛋白复合物。
GST pull down WB结果图(阳性)
GST Pull-down MS:Western blot检测图
GST pull-down MS:质谱检索表格(部分展示)
1. Ni P.Y. et al: YBX1-Mediated DNA Methylation-Dependent SHANK3 Expression in PBMCs and Developing Cortical Interneurons in Schizophrenia. Advanced Science. 2023. IF=17.521.
2. Chen R. et al: Lnc-GD2H Promotes Proliferation by Forming a Feedback Loop With c-Myc and Enhances Differentiation Through Interacting With NACA to Upregulate Myog in C2C12 Myoblasts. Front Cell Dev Biol. 2021, IF=6.684.
3. Ma Y. et al: New insights into the proteins interacting with the promoters of silkworm fibroin genes. Scientific Reports. 2021, IF=4.379.
辉骏实力
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