无论药物研发还是基础科研,检测化合物(如小分子药物)与蛋白质之间的相互作用都是一类重要的实验。化合物pull down是体外研究化合物与蛋白质相互作用的方法。利用生物素与链霉亲和素之间的高亲和力,可以从各种类型目标样本中调取目标化合物的结合蛋白。
生物素标记的化合物先与链霉亲和素磁珠孵育,之后与样本蛋白液孵育,目标化合物及其结合蛋白便一起吸附在磁珠上。洗涤去掉未结合的蛋白后,用洗脱液将结合蛋白从磁珠上洗脱下来,之后可以采用Western Blot技术检测特定的结合蛋白,还可以采用质谱方法鉴定与目标化合物结合的未知蛋白。
化合物 pull down WB
(验证型)
实验样本
生物素标记的化合物和单生物素对照
待测蛋白抗体
实验信息表
pull-down捕获生物素标记化合物及其结合蛋白
Western blot检测图
pulldown实验报告
化合物 pull down MS
(筛选型)
pulldown捕获生物素标记化合物及其结合蛋白
SDS-PAGE银染检测图
pull-down实验报告
质谱检索结果及报告
互作蛋白筛选表格
生信分析结果和报告
▲注意:以上均为每组样本的送样量,如果实验和对照组用的样本一致,此样本量*2。详细送样指南可联系辉骏生物索取。
保存及运输:-80℃保存,干冰取样/运输,至少在送样前2天通知我司。
药物Pull down MS产物银染图
药物Pull down MS质谱检索表格(部分展示)
潜在结合蛋白的生物信息学分析结果(部分展示)
Chen X. et al: Celastrol induces ROS-mediated apoptosis via directly targeting peroxiredoxin-2 in gastric cancer cells. Theranostics. 2020.
使用相关技术:RNA pull down MS、小分子pull down、化合物pull down、药物pull down
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