货号 | 规格 | 货期 | 价格 |
FI8706-12T | 12次 | 现货 | |
FI8706-24T | 24次 | 现货 |
染色质免疫共沉淀ChIP是研究体内DNA与蛋白质结合的技术。先用甲醛交联细胞内的“蛋白-DNA”复合物,裂解细胞后,用超声波破碎DNA至适合的长度,采用特异性抗体捕获细胞内的诱饵蛋白及其结合的DNA片段,再加入protein G树脂沉淀“抗体-诱饵蛋白-结合DNA” 复合体,随后将蛋白与DNA解交联,提取结合的DNA。该DNA可用于后续的定量PCR检测(qPCR)或高通量测序(seq)。
基因表达是一个复杂、调控有序的过程,DNA与蛋白质的相互作用是基因转录起始和调控的关键。ChIP(染色质免疫共沉淀)是检测体内条件下DNA与蛋白质相互作用的方法,用于验证或寻找与已知蛋白结合的DNA序列。以下列举了可应用ChIP试剂盒的几个研究方向:
试剂名称 | 体积(12 Tests) | 保存条件 |
Protein G树脂 | 500 μL | 4 ℃,1年 |
裂解缓冲液 | 7 mL | 4 ℃,1年 |
漂洗液 | 25 mL | 4 ℃,1年 |
洗脱缓冲液 | 600 mL | 4 ℃,1年 |
10xTE缓冲液 | 50 μL | 4 ℃,1年 |
NaCl | 250 μL | 4 ℃,1年 |
Proteinase K | 100 μL | -20 ℃,1年 |
RNaseA | 100 μL | -20 ℃,1年 |
蛋白酶抑制剂 | 170 μL | -20 ℃,1年 |
ChIP试剂盒—辉骏生物产品优势
2. 操作简便,周期短,适合初学者。
3. 品质好,实验结果稳定。
4. 适配后续qPCR和高通量测序实验。
实验目标:检测诱饵蛋白(A)和待测DNA序列(B)的结合。
图一:诱饵蛋白的western-blot检测图
Normalized to Input | B基因-引物1 | B基因-引物2 |
---|---|---|
Input | 1 | 1 |
IgG_ChIP | 0.01% | 0.01% |
Anti-A_ChIP | 0.44% | 0.23% |
Normalized to IgG | B基因-引物1 | B基因-引物2 |
IgG_ChIP | 1 | 1 |
Anti-A_ChIP | 59.19 | 50.80 |
ChIP-qPCR结果统计表
图二:ChIP-qPCR结果统计图
1. Zhuang Q. et al: NCoR/SMRT co-repressors cooperate with c-MYC to create an epigenetic barrier to somatic cell reprogramming. Nature Cell Biology. 2018. IF=28.213.
2. Chen R. et al: Lnc-GD2H Promotes Proliferation by Forming a Feedback Loop With c-Myc and Enhances Differentiation Through Interacting With NACA to Upregulate Myog in C2C12 Myoblasts. Front Cell Dev Biol. 2021. IF=6.684.
辉骏实力
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