荧光定量PCR(qPCR)技术实验原理
实时荧光定量PCR(qPCR)是对基因进行相对或绝对定量的实验技术,分为探针法和染料法两种方法。
染料法的原理是:在PCR反应体系中加入荧光基团,随着PCR循环数的递增,PCR产物不断积累,荧光信号也会相应的增加,这样就可以通过荧光强度的变化来对PCR反应进行实时的监测。在PCR扩增的指数时期,模板的CT值和该模板的起始拷贝数存在线性关系,所以成为定量的依据。
我公司可提供基于SYBR Green染料法的荧光定量PCR服务。
荧光定量PCR服务流程
❶ 引物设计与合成
❷ 基因模板制备:RNA提取和反转录,或DNA提取;
❸ qPCR预实验:检测目的基因和内参基因的扩增情况;
❹ qPCR正式实验:每个样本设置三复孔;确定样本扩增产物单一,内参基因CT值正常;
❺ 数据分析和出具报告:计算样本间的目的基因表达差异,并作柱形图。
荧光定量PCR服务信息
项目名称 | 客户提供 | 结果交付 | 实验周期 | 价格
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荧光定量PCR | 原始样本(干冰运输,广州地区可上门取样) 实验信息表(样本信息,待测基因序列,内参要求等) | 1、qPCR原始数据 2、扩增曲线和溶解曲线 3、定量分析数据 4、实验报告 | 2-4周 |
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荧光定量PCR(qPCR)实验服务*辉骏优势
十年服务经验,客户成果发表在NatureMethods,Oncogene,Cell Research等高水平期刊上。
自有分子及细胞生物实验平台,能有效制定并执行最优的实验路线。
售后技术支持将一直保持到客户发表文章,确保客户安心进行下游实验及投稿。
PCR(qPCR)荧光定量结果示例
实时荧光定量PCR(qPCR)扩增曲线图
实时荧光定量PCR(qPCR)溶解曲线图
辉骏实力