抗体蛋白质测序只是简单地定义未知抗体的氨基酸序列。 在抗体蛋白的从头测序中使用质谱法使得在没有可用的细胞系或事先知道 DNA 序列的情况下执行此操作成为可能。
蛋白质分子的质谱测量作为测序技术的基础,它只需要0.2毫克的蛋白质。分析和报告之间的时间已缩短至数周。详细报告包括重链和轻链序列、支持报告序列的相关数据以及对蛋白质分子的其他评论。
对抗体使用从头测序的好处包括:
如果产生特定抗体的杂交瘤丢失或不可用,抗体本身仍然可以通过重组复制,只需使用 0.2 mg 单克隆抗体蛋白。如果连这么多都没有,可能还有其他办法。
使用具有优化设置的高分辨率质谱技术 ,以及用于抗体从头测序的专有软件,意味着可以对整个蛋白质从 n-term 到 c-term 进行测序,包括每个氨基酸。
由于在单独肽的多个质谱读数中获得了强信号峰特征,因此可以正确识别序列中的每个氨基酸。
基于质谱的技术可用于测序所有类型的抗体,无论是 IgA、IgM、IgG、IgY、Fab、ScFv 等,来自所有类型的动物物种,包括小鼠、大鼠、兔子和仓鼠,除了来自人类。 它甚至已被用于对受污染或结合的抗体或成对具有不同轻链的抗体进行测序。
该技术的目标是完美的质谱蛋白质测序。 这导致人们不断努力生产优化的工作流程和软件,以便对每种蛋白质进行测序,无论多么困难,并保持最高质量标准。
这种抗体从头测序的使用通常会导致检测到测序中的意外差异或蛋白质分子上的新糖基化位点,而 DNA 测序无法检测到这些差异。
用于从头抗体测序的质谱方法仅适用于等待测序的一个或数百个抗体分子。
在典型情况下,该技术需要 0.2 mg 或更多纯度至少为 95% 的单克隆抗体。 分析后,可交付成果包括一份详细的报告,其中给出了重链和轻链的完整序列,以及支持结果的相关数据,以及任何其他有用的评论,例如观察抗体的意外变化。 所需时间通常为收到样品后 1-2 周。
辉骏生物是抗体蛋白质测序技术的领导者,团队专注于基于质谱的蛋白质组学领域,开发了无需访问生产细胞系即可直接对抗体蛋白质进行测序的技术。 辉骏生物抗体蛋白测序服务可在常规基础上对任何给定的抗体蛋白进行准确测序,保证100%测序准确度,对轻链的测序误差范围在+/-1.2Da,对重链的误差范围在+/-1.8Da,保证交付抗体活性,不成功不收费。
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