进行 Input 样本制备时,担忧蛋白降解、蛋白浓度不足等问题?其核心关键在于样本裂解效率与蛋白保护措施的精准把控!辉骏生物 Input 样本制备全流程视频实操,全程标准化演示,有效规避实验误区,保障样本制备质量。
实验提示:
1️⃣ 裂解液配制(加入适量蛋白酶抑制剂和磷酸酶抑制剂,抑制蛋白降解,保护蛋白活性); 2️⃣ 样本裂解(根据样本类型选择超声裂解或4°转盘裂解,超声时注意冰浴降温,避免过热损伤蛋白,裂解至样本澄清无沉淀); 3️⃣ 离心去上清(4°高速离心,收集上清液,去除细胞碎片、沉淀等杂质,上清液即为input样本,避免沉淀干扰后续结合实验)。
若Input检测不到目标蛋白/待测蛋白,或检测到的条带微弱,可能是以下原因+解决方案❗ ① IP抗体亲和力不足(常见原因):抗体无法有效结合抗原,导致检测不到目标信号,这种情况直接更换IP抗体即可; ② 目标蛋白表达量低:可通过增加蛋白上样量,提升蛋白检测浓度或者是通过转染带标签的过表达质粒,提高目标蛋白的表达量。
若您在免疫沉淀(IP)实验过程中遭遇抗体轻重链污染问题,辉骏生物科可为您提供专业解决方案:
① 标签Co-IP实验:推荐选用辉骏生物标签纳米抗体磁珠,涵盖 Flag、HA、V5、GFP、RFP 等多种可选标签,可特异性结合目标标签,有效规避抗体轻重链污染
产品名称 | 货号 | 说明 |
FI8201 | 彻底消除抗体轻重链污染 | |
FI8202 | ||
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FI8206 |
② 内源Co-IP实验:建议选用 IP专用二抗,通过特异性筛选设计,显著降低轻重链干扰,保障实验结果准确性。
广州辉骏生物科技股份有限公司(Fitgene)成立于2011年,超15年科研服务经验,专业提供蛋白(抗体)和互作实验服务,包括蛋白质谱检测、蛋白/RNA/DNA/化合物等分子间相互作用检测、抗体稳定表达株构建、基因敲除和过表达细胞株构建等;同时还研发了纳米抗体磁珠、IP专用二抗、互作试剂盒、标签抗体等科研产品。
公司自有分子、细胞和蛋白等实验平台,服务经验丰富,保证结果真实、可靠!我们不仅会提供专业的售前方案建议、而且售后技术支持将一直保持到文章发表,确保您安心进行下游实验及投稿。
目前,客户已在Signal Transduction and Targeted Therapy(IF: 52.7)、Journal of Hematology & Oncology(IF: 40.4)、European Heart Journal (IF: 35.7)、Molecular Cancer(IF: 33.9)、Cell Discovery (IF: 33.5)、Nature Methods(IF: 32.1)等高水平期刊成功发表大量高分文章。

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