根据样品SDS-PAGE图(注:SDS-PAGE无过度染色情况),判断样本本身的蛋白质丰富程度,蛋白质条带较少或者较浅(含量低)都会导致鉴定结果不佳,可考虑增加样本量再进行检测。
根据SDS-PAGE图判断样品中是否存在高丰度蛋白质,高丰度蛋白质会影响样本整体蛋白质鉴定数量。
有些物种的数据库质量不好,包含的蛋白数目过少,这种可以考虑换大一级的物种分类数据库,或者选择在进化树上同源性较近的、研究比较清楚的、基因组数据库相对完整的模式物种的数据库重新查库。
样本中有污染或干扰物质,例如常见的有PEG、各种表面活性剂(如SDS、CHAPS、Triton、Tweens、NP-40等),一般在质谱的表现为规律的分子量间隔约44的峰。
辉骏生物会根据TIC、basepeak图等,判断酶解、仪器状态等是否正常,如果是仪器问题导致的鉴定结果不好,我方会即刻告知客户并安排重复实验。
辉骏生物10年专注LC-MS/MS蛋白鉴定实验,服务到投稿,客户已在Nature methods,Nature Cell Biology,Nature Plants,Nature communication,Annals of the rheumatic diseases,Journal of Hematology & Oncology等高水平期刊成功发表论文。
LC-MS/MS蛋白鉴定实验服务内容包含:蛋白酶解、多肽纯化、LC-MS/MS检测,数据库检索、蛋白修饰鉴定等项目。可以一次性鉴定成百上千种蛋白质,准确性和灵敏度高。实验热线:4006991663,欢迎新老客户前来咨询!
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