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如何选择免疫共沉淀(Co-IP)实验抗体?

多克隆抗体

单克隆抗体

单克隆抗体群(由一个免疫原产生的多个单克隆抗体混合物)

抗体抗原信号强度极佳由抗体的亲和力决定(极佳或者极弱) 极佳
特异性通常很好,但有时会有非特异性相互作用 极佳,但有时会有交叉反应 极佳(由于选择可以进行IP且没有交叉反应的抗体组成单克隆抗体群) 
优点 亲和力高(由于抗体可以与目的蛋白的多个抗原决定簇相互作用) 特异性好,且可以无限量供应 特异性好,亲和力高(由于选择可以进行IP且没有交叉反应的抗体组成单克隆抗体群) 
缺点非特异性相互作用很难去除 需要筛选亲和力高的抗体;抗原表位可能会被相互作用蛋白遮蔽 能够筛选得到的符合条件的单克隆并不多,所以单克隆抗体群也就不容易获得 
免疫沉淀效果极佳(由于亲和力高) 由抗体的亲和力决定(极佳或极弱) 极佳(由于选择可以成功进行IP且没有交叉反应的抗体组成单克隆抗体群) 
免疫共沉淀效果
通常很好,但有时非特异性相互作用会带来假阳性 有抗体的亲和力决定和抗原表位是否被相互作用蛋白遮蔽决定(极佳或极弱) 极佳(由于选择可以成功进行IP且没有交叉反应的抗体组成单克隆抗体群)
染色质免疫沉淀效果 通常很好,但有时非特异性相互作用会带来假阳性 由抗体的亲和力决定和抗原表位是否被遮蔽或者以及抗原表位是否被交联实验所破坏决定(极佳或极弱) 极佳(由于选择可以成功进行IP且没有交叉反应的抗体组成单克隆抗体群) 


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