1. iTRAQ是一级质谱定性,二级质谱定量,实际操作中,一级质谱中m/z相近的一些母离子,而不是严格的同一m/z的母离子,被筛选进入质量分析器2进行二级质谱鉴定,定量的肽段与定性的肽段不是一一对应的关系,故造成iTRAQ定量误差大。然而,SILAC是一级质谱定量,二级质谱定性,定量的肽段就是对应的定性的肽段,定量更加精确。
2. iTRAQ在母离子进入质量分析器2前要进行母离子破碎,但是母离子破碎的比率达不到100%,造成报告离子的峰强偏低,定量存在误差。
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