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蛋白质间相互作用是其发挥功能的主要模式,蛋白质通过结合不同的伙伴来行驶不同功能,形成复杂的信号网络。免疫共沉淀(Co-IP)、pull down、荧光共定位等都是最常见的蛋白互作研究方法。辉骏生物的合作伙伴——中山大学肿瘤中心华南肿瘤学国家重点实验室在Cancer Research(1区,IF=12.5)上发表的论文,就同时采用了Co-IP和GST pull down方法,研究了糖原合成酶2(GYS2)在乙肝病毒相关性肝癌中的机制。
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RNA pulldown探针制备先确定目标序列,根据实验目的确定合适的RNA序列,可以是目标转录本的全部序列或部分序列,对照组通常采用反义序列,也可以是无关序列.如果目标序列小于100bp,建议直接合成带标记的RNA,如果大于100bp,可按照辉骏生物提供的步骤体外转录获得.为解决RNA探针标记的难题,辉骏生物研发了一种新的标记方法,利用一段只有16nt的RNA标签“F2”来标记RNA,100%标记,操作简单,成本低
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RNA pulldown用于检测RNA-蛋白质、或RNA-RNA之间相互作用的技术,其基本原理是:利用带标签的目标RNA探针与待测蛋白质或RNA进行体外或体内结合,通过亲和作用将复合物分离出来,之后采用Western Blot、质谱技术检测结合蛋白或采用qPCR、测序技术检测结合RNA。辉骏生物研发了一种新的标记方法,利用一段只有16nt的RNA标签“F2”来标记RNA,再采用与F2具有强大亲和力的配体磁珠捕获互作复合体。这种标记方法可用于标记各种类型的RNA(lnRNA、mRNA、circRNA、pre-miRNA或pri-miRNA),操作简单、成本低。
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难道没有完全无污染的抗体beads吗?当然有!结合多年的互作实验和质谱经验,辉骏生物开发了专门解决轻重链污染问题的ChainFree®标签抗体磁珠,涵盖了目前主流的多种标签,比如Flag、HA、Myc、V5、GFP、mCherry。该磁珠上偶联了经过严格筛选、优化并重组表达的无轻、重链的标签抗体,完全解决了抗体污染问题
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辉骏生物可提供rip、rip seq、rip qpcrS实验,价格低 周期短,可对围绕RNA结合蛋白开展的整体课题提供全方位方案建议.RIP/RIP-seq或RNA免疫沉淀/RNA免疫沉淀测序是一种高通量实验技术,用于研究RNA和RNA结合蛋白之间的相互作用。它允许识别细胞或组织内的特定RNA结合蛋白。
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蛋白测序主要是依靠化学或酶消化的方法来分离多肽并检测氨基酸残基的数量和组成,辉骏生物可对多种蛋白样品提供蛋白质测序,蛋白从头测序等服务,辉骏基于高精度、高分辨率质谱设备,结合自主研发的测序技术平台,能够实现对目标蛋白氨基酸序列的精准解读.该技术可以用于解析任何纯蛋白样本,比如工具酶、突变蛋白、单克隆抗体等
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蛋白质质谱分析是指在蛋白质研究和表征中使用质谱分析,包括蛋白质的定量、分析、相互作用图谱以及翻译后修饰的鉴定。 蛋白质质谱分析也可称为基于质谱的蛋白质组学。 基于质谱的蛋白质组学由三种方法组成:自上而下、中下和自下而上的蛋白质组学。
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辉骏生物提供抗体测序技术服务,抗体从头测序服务,单克隆抗体从头测序服务,蛋白质测序,抗体解析,抗体表达等多类抗体实验外包基于高精度、高分辨率质谱设备,结合自主研发的测序技术平台,实现对抗体氨基酸序列的精准解读。同时,我们有自建的高通量表达验证平台,能够对已测得的抗体序列进行高通量表达验证,从而保证交付抗体的活性。蛋白质测序最有用的应用之一是确定抗体序列。有争议的是,蛋白质测序是目前可用于阐明抗体编码的最合适的技术。特别是重新蛋白质测序是抗体测序的完美应用,因为它避免了基于同源性的数据库搜索中的随机或偏倚引入。
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抗体基因座包含各种基因片段,这些基因片段在发育中的B细胞中重新排列以产生高度可变的抗体库。轻链可变区(LC)由两个基因片段组装而成,一个长可变(V)片段和一个短连接(J)片段。重链(HC)可变区由V区段、J区段和多样性(D)区段组装而成。
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BLAST是生命科学研究中常用的一套在蛋白质数据库或核酸数据库中进行序列相似性比对的一套分析工具。英文全称是Basic Local Alignment Search Tool。NCBI作为生命科学研究领域使用最为广泛的数据库之一,深受广大科研工作者青睐。辉骏生物给大家简单介绍一下NCBI上的blast比对。
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抗体或免疫球蛋白(Ig)保持共同组成的四级结构两个相同的重链(高碳钢)和两个相同的轻链(LCs)。 结构heterotetrameric与二硫桥连接高碳钢和LCs在一起形成规范化免疫球蛋白“Y”的形状。变量域(V)的重型和轻型链(VH和VL分别产生抗原特异性通过高度可变的氨基酸序列。 V域与抗原相互作用时,恒域(C)在重型和轻型链相互作用效应和分子的蛋白质。 高碳钢有三个常数区域,与一个在LCs,屈指可数的n端来糖基(CH1,CH2,CH3)
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SILAC实验技术于2002年首次引入,作为南丹麦大学实验生物信息学中心 (CEBI) 的一种代谢标记技术。在活细胞的生长培养基中使用了稳定的同位素标记的氨基酸,随后可以对不同实验条件下的细胞蛋白质组学进行广泛比较。辉骏生物SILAC定量蛋白质组学实验技术服务拥有10多年丰富经验;公司自有蛋白质组学平台,silac蛋白质谱分析外包代作价格低,已帮助众多科研者发表高分文献。