新型单克隆抗体NA8和NE12可中和大多数新型冠状病毒变异体和亚变异体-辉骏生物

新型单克隆抗体NA8和NE12可中和大多数新型冠状病毒变异体和亚变异体

发布时间：2022-11-07 15:03:56作者：辉骏生物-fitgene

在最近发表于的一项研究中细胞报告，研究人员产生并表征了两种单克隆抗体(NA8和NE12 )它们针对严重急性呼吸综合征冠状病毒2型(新型冠状病毒)的受体结合结构域刺突蛋白并表现出针对主要新型冠状病毒变异体的中和活性。

背景

尽管疫苗和单克隆抗体疗法的快速发展限制了与冠状病毒疾病2019(新冠肺炎)疫情相关的发病率和死亡率，但携带能够免疫逃避的突变的新型冠状病毒奥米克隆亚变异体的出现和全球主导地位越来越令人担忧。

新型冠状病毒变异体(BA.1)在刺突蛋白区域含有30个突变，其中15个在受体结合结构域，这是最中和抗体目标。亚变异体BA.4和BA.5在全球优势中取代了其他变异体，并表现出对疫苗和以前的新型冠状病毒感染引起的中和抗体的抗性。

目前的治疗性单克隆抗体也表现出降低的功效针对这些亚变异体，强调需要更有效的抗体疗法来解决新出现的染色体亚变异体。

关于研究

在本研究中，研究人员使用从12名新冠肺炎患者的外周血单核细胞(PBMC)中提取的核糖核酸(RNA ),构建了噬菌体展示片段抗原结合(Fab)文库，这些患者具有针对新型冠状病毒的高滴度中和抗体。

酶联免疫吸附测定(ELISA)用于筛选特异性结合三聚体刺突蛋白的克隆。脱氧核糖核酸(DNA)测序用于鉴定具有不同序列的克隆，然后将其表达为可溶性fab和完全免疫球蛋白G1 (IgG1)抗体。使用ELISA测试IgG抗体的结合亲和力，同时使用表面等离子体共振测试Fabs对三聚体刺突蛋白的结合亲和力。

使用假型病毒进行中和试验以评估所选的单克隆抗体。使用竞争ELISA测试单克隆抗体对刺突蛋白的受体结合结构域的特异性。该研究还测试了抗WA-1(北美创始人菌株)和其他相关变异体的单克隆抗体的中和能力。此外，将所选单克隆抗体的中和能力与临床使用的单克隆抗体的中和能力进行比较。

使用低温电子显微镜(cryo-EM)来了解新型冠状病毒刺突蛋白三聚体和来自该研究的两种最有效的单克隆抗体NA8和NE12之间的结构相互作用。

此外，仓鼠模型用于测试在活生物体内NA8和NE12的预防效果和治疗活性。为了测试预防效力，在用新型冠状病毒的β变体和WA-1株进行鼻内攻击之前，用不同浓度的单克隆抗体对仓鼠进行腹膜内接种。在用WA-1菌株和β变体感染仓鼠后，通过向仓鼠腹膜内施用单克隆抗体来测量治疗效果。

结果

结果表明，NA8和NE12具有互补的特性，并对所有主要的相关新型冠状病毒变异体表现出有效的中和作用。NA8单克隆抗体在皮摩尔浓度下对β变体和6个BA.1和BA.2亚变体表现出广泛的中和能力，在纳摩尔浓度下对最近的BA.2.12.1和BA.4亚变体表现出广泛的中和能力。

cryo-EM结构分析图像揭示了NA8抗体具有高度保守的结合表位，该表位具有轻微移位的受体结合脊，这允许它避开β和β受体结合区的突变区。观察到NE12表位与受体结合结构域的血管紧张素转化酶-2 (ACE-2)受体足迹重叠。尽管具有部分重叠的表位，NA8和NE12的联合使用并没有显示出任何单克隆抗体中和能力的降低。

这两种单克隆抗体也显示了很高的预防和治疗效力在活生物体内，当在仓鼠模型中测试时。此外，与目前临床使用的单克隆抗体相比，NA8和NE12表现出有效和广泛的中和作用。