中文标题：富马酸诱导的LncRNA-MIR4435-2HG能调节谷氨酰胺代谢重塑，促进富马酸水合酶缺陷型肾细胞癌的发展

发表期刊： Cell Death and Disease

中科院分区：1区

影响因子：9.2

发表时间：2024年2月

客户单位：上海交通大学医学院上海儿童医学中心

使用产品：F2-RNA pull down试剂盒（辉骏生物自主研发产品，点击查看）

● 研究背景
      富马酸水合酶(FH)缺陷型肾细胞癌(RCC)是一种代谢紊乱引发的肿瘤，其发生的根本原因是FH基因的功能突变导致富马酸水合酶无法正常编码，进而引起富马酸在细胞微环境中积累。此外，富马酸盐也可以作为一种表观遗传调节剂。本研究探索了参与FH缺陷型RCC疾病过程的lncRNA及其作用机制。

● 内容概述

2024年2月，上海交通大学医学院的研究人员在国际期刊Cell Death & Disease上发表题为“Fumarate induces LncRNA-MIR4435-2HG to regulate glutamine metabolism remodeling and promote the development of FHdeficient renal cell carcinoma”的最新论文，探讨了FH缺陷型肾细胞癌(RCC)的代谢机制，发现LncRNA-MIR4435-2HG在FH缺陷型RCC中特异性高表达。LncRNA-MIR4435-2HG受到富马酸盐调控，其缺失可抑制谷氨酰胺代谢。从机制上看，LncRNA-MIR4435-2HG能特异性结合转录因子STAT1，进而转录激活GLS1，增强谷氨酰胺代谢，在FH缺陷型RCC发展中发挥关键作用。GLS1抑制剂CB-839可显著抑制该肿瘤生长。

● 研究路线
1. 转录组和qPCR检测发现：LncRNA-MIR4435-2HG在FH缺陷型RCC中特异性高表达；

2. 细胞和组织检测表明：MIR4435-2HG的缺失显著降低了FH缺陷型RCC肿瘤的生长；

3. ChIP和表达检测发现：富马酸盐通过H3K4me3修饰诱导MIR4435-2HG表达；
4. 代谢组学和表达实验表明：LncRNA-MIR4435-2HG通过增加谷氨酰胺代谢来促进FH缺陷型RCC发展；
5. RNA pull-down MS和ChIP等互作实验发现：LncRNA-MIR4435-2HG特异性结合转录因子STAT1，进而转录激活谷氨酰胺酶1(GLS1)，促进谷氨酰胺代谢重塑；
6. 体内体外实验表明GLS1抑制剂CB-839可显著抑制FH缺陷型RCC的增殖。

● 结论
本研究通过转录组学检测发现了LncRNA-MIR4435-2HG在细胞和组织中高表达，之后利用代谢组学和RNA pull down等方法分析了MIR4435-2HG在临床样本、细胞和动物模型中调控FH缺陷RCC代谢重塑的分子机制，确定了LncRNA-MIR4435-2HG可以作为药物敏感性标记物，并找到了该疾病的潜在治疗靶点GLS1。

F2-RNA pull down试剂盒简介

辉骏生物自主研发的 F2-RNA pull-down 试剂盒（专利号：ZL202111160837.9），利用一段只有16nt的RNA标签“F2”与目标RNA连接，通过固定在磁珠上的特异性配体与F2标签的强亲和力，高效调取目标RNA，同时捕获与之结合的蛋白；之后可以采用Western Blot技术检测特定蛋白，也可以采用质谱（LC-MS/MS）技术鉴定未知蛋白。

辉骏生物FII-RNA pull down试剂盒和方法及其应用专利证书

F2-RNA pull down试剂盒产品优势

1、F2标签是一段RNA序列，可以连接和标记各种类型的RNA；

2、F2标签很短，只有16nt，几乎不影响目标RNA的结构或功能；

3、可以用于体内或体外标记目标RNA；

4、F2标签与其特异性配体具有很强亲和力，能够高效调取F2-RNA及其结合蛋白。