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Flag-TST双标签免疫沉淀/免疫共沉淀试剂盒
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Flag-TST双标签免疫沉淀/免疫共沉淀试剂盒产品简介


辉骏生物的Flag-TST双标签免疫沉淀/免疫共沉淀试剂盒能够高效完成单标签或双标签融合蛋白的纯化及其互作蛋白的调取。以双标签融合蛋白做TAP为例,将Flag标签、TST标签与目标蛋白在目的细胞中融合表达,分别采用TST树脂和Flag树脂进行两步串联的亲和纯化,最终获得目标蛋白及其互作蛋白复合物。


FLAG-tag 是一段由8个氨基酸残基组成,N-DYKDDDDK-C (1012 Da),其作用是标记蛋白。在蛋白表达和定位研究中,可以通过基因工程技术手段将所要研究的目的基因和FLAG-tag基因序列连接起来,可以连接在目的蛋白的C端或N端,然后将整合后的基因转入细胞中或胚胎干细胞亦或受精卵中。


TST标签是strep-tagⅡ(Trp-Ser-His-Pro-Gln-Phe-Glu-Lys)的升级版,由两个strep-tagⅡ外加连接臂组成,与融合蛋白结合能力更强,结合位点更多,其作用是标记蛋白。在蛋白表达和定位研究中,可以通过基因工程技术手段将所要研究的目的基因和TST-tag基因序列连接起来,可以连接在目的蛋白的C端或N端,然后将整合后的基因转入细胞中或胚胎干细胞亦或受精卵中。



Flag-TST双标签免疫沉淀/免疫共沉淀试剂盒组分(20份):

 试剂名称 体积 保存条件
 TST树脂 2mL 4 ℃
 Flag树脂 1mL
 -20 ℃
 裂解缓冲液3*50mL 4 ℃
 漂洗缓冲液A 10mL
 -20 ℃
 洗脱缓冲液B 1mL
 -20 ℃



Flag-TST试剂盒产品优势*辉骏生物


1. 既可用于TST和Flag双标签蛋白的串联纯化,又可用于TST或Flag单标签蛋白的纯化;

2. 抗体与树脂偶联,因此纯化复合物中几乎不含抗体污染,Western Blot或LC-MS检测不受影响;

3. 串联纯化可以有效降低互作蛋白的假阳性率,使后续验证更加简单;

4. 亲和材料经过特殊优化,与诱饵蛋白结合更多且结合力更强。



Flag TST试剂盒使用流程简述


1. 将细胞裂解液与TST树脂,室温下孵育1-2小时,或4 ℃过夜。

2. 在室温下,经过漂洗,洗脱得到洗脱液1。

3. 在洗脱液1中加入到Flag树脂中,室温孵育2-3小时,或4 ℃过夜。

4. 室温下,漂洗,加洗脱缓冲液B得到最终洗脱产物。


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