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SILAC实验技术研究蛋白质相互作用综述

一、SILAC定量蛋白质组学研究蛋白质与蛋白质相互作用

  本篇文献总结了SILAC定量蛋白质组技术如何研究蛋白质相互作用,下面以Tag-CoIP法简要介绍其原理,详细信息请参考原文。

 

原理:
   1):用稳定同位素氨基酸
标记细胞后,转染代有标签的目的
蛋白质(如GFP-bait,已可用其他标
签,如flag,his,biotin)质粒进入
型细胞。
  
   2):提取型和型细胞的蛋白质(总蛋白质,核蛋白,膜蛋白质等),等量混合型蛋白和型蛋白质。
  
   3):用tag标签的抗体进行CoIP,沉淀下来的蛋白质SDS-PAGE分离后,LC-MS/MS分析。

 

二、文章意义:本片综述详细总结了目前通过SILAC定量蛋白质组学技术研究蛋白质与蛋白质相互作用的方法。如Pull-dowm法,Tag-CoIP法等。

 

三、文献来源:J. Cell Biol. Vol. 183 No. 2 223-239

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