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SILAC蛋白质组学技术研究DNA相互作用蛋白质

一、SILAC实验技术研究蛋白质与DNA相互作用原理:

 

SILAC技术研究蛋白质与DNA相互作用步骤:

(1)细胞分别用“轻”型和“重”型同位素标记后,提取蛋白质,等量混合。

(2)“轻”蛋白质与对照DNA探针进行孵育,“重”型蛋白质与目标DNA孵育,洗脱后等量混合。

(3)混合蛋白质经过胰蛋白酶切割后质谱分析,通过比较“重”型蛋白质与“轻”型蛋白质的量来分析是否是目的DNA特异性相互作用的蛋白质。

 

二、意义:通过SILAC定量蛋白质组学可高通量研究DNA相互作用蛋白质

 

三、文献来源: Genome Res,2009 19:284-293

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