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质粒提取实验:碱裂解法提取方案
质粒是存在于细菌染色体外的一个或多个能独立复制并稳定遗传的小型环状双链DNA分子,其分子量一般在0.2-10KD范围内。由于质粒分子小,便于分离和提取,可以携带目的基因进入细菌、动物细胞或植物体内进行扩增与表达。 质粒提取方法即去除RNA,将质粒与细菌基因组DNA分开
蛋白纯化His-tag介绍
1、何为His-tag? His-tag单抗又叫6*His-tag单抗,或6*His单克隆抗体,用小鼠制备,His可被镍柱吸附,用于纯化重组蛋白,无论表达的蛋白是可溶的或者包涵体都可以用固定金属离子亲和层析(IMAC)纯化。金属螯合亲合层析,又称固定化金属离子亲合层析(Immobilized meta
6大操作助你轻松掌握ELISA实验结果
作为ELISA的最后一步,检测结果的计算对整个实验十分重要。辉骏生物介绍一种常用的ELISA检测结果计算方法-使用origin软件,以夹心法为例,ELISA的样本通常要设置复孔进行检测,分别求出标准品、实验组样本的吸光度的平均值。样本的OD(吸光度)平均值要减去标准品浓度
【技术贴】三大具体步骤完善细胞培养
具体步骤: 1、细胞复苏 将冻存细胞从液氮中取出后,在37℃水浴锅内不断摇动促进其融化。将融化的细胞移入离心管中,加入37oC预热的DMEM完全培养基中(其中胎牛血清约为10%),轻轻吹匀,离心,500g离心2min,弃上清液。加入DMEM完全培养基清洗,弃上清液。 加入DMEM完
如何制备原生质体?
非哺乳动物细胞,包括细菌、真菌和植物细胞,都有一个细胞壁结构来维持细胞的形状。细胞壁位于细胞膜外面,特别坚固,其特别的组成成分含有聚合物,包围细胞内部脆弱的细胞质,支撑和保护细胞。在细菌中,细胞壁包括几层肽聚糖,真菌细胞壁含有几丁质,几丁质是昆虫壳
活细胞成像实验技能
活细胞成像是利用延时成像(从毫秒到小时)研究活细胞的动态生理过程。活细胞成像将多个快照转换成电影,这与固定细胞成像在一个时间点检查细胞的活动形成对比。活细胞成像的典型应用用于研究动力学事件,包括酶活性、信号转导、蛋白质运输和膜循环过程。 活体细胞成像
蛋白质组技术研究进展
大规模基因组测序计划的实施已改变生命科学的重心,在相当短的时期内,一些原核生物和某些低等真核生物的基因组序列已被测定。1995年,流感嗜血杆菌基因组序列首次被破译,在此后不到两年的时间,近50个细菌的基因组序列已被完成。然而,这仅仅是理解有机物功能的一个起
蛋白质与蛋白质组学
对于 蛋白质组学 的研究来说,它的最基本的实验手段就是利用 双向凝胶电泳 (two-dimensional protein electrophoresis, 2DE),在整个 基因组水平上检测蛋白质表达的情况。双向凝胶电泳首先利用等电点聚焦来分离不同等电点的蛋白,再利用SDS-PAGE来分离不同分子量的蛋白
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