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【黑科技】ELISPOT在免疫研究领域作用
ELISPOT的大名是酶联免疫斑点实验(Enzyme linked immunospot assay),它的出现是基于酶联免疫吸附实验的广泛发展,特别在免疫研究领域,在测定各种免疫应答相关的体液游离细胞因子(CK)和特异性抗体时,传统的ELISA方法往往显得力不从心。这是由于细胞因子分泌特性及
血清有哪些常见作用?
血清对于在传统培养基配方中生长和增殖的大多数细胞系来说是需要的,因为大多数单独的培养基并不能提供细胞生长所需要的全部营养,如MEM培养基,较为常用的量为8%~10%的比例,原代培养使用量为15%~20%,而特殊的低血清培养基血清量可降至3%左右,细胞的形态和功能
细胞冻存与复苏注意事项
细胞储存在液氮中,温度达-196℃,理论上储存时间是无限的。细胞冻存及复苏的基本原则是慢冻快融,实验证明这样可以最大限度的保存细胞活力。 在不加任何物质的条件下,直接冻存细胞时,细胞内和外环境中的水都会形成冰晶,能导致细胞内发生机械损伤、电解质升高、渗透
如何准确判断免疫组织化学结果?
免疫组织化学(简称免疫组化)是组织化学的一种,它是利用已知的特异性抗体或抗原能特异性结合的特点,通过化学反应使标记于结合后的特异性抗体上的显示剂,如酶、金属离子、同位素等,显示一定的颜色,并借助显微镜观察其颜色的变化,从而在抗原抗体结合部位确定组织
蛋白定量方式—Bradford法
BCA法实验原理:碱性条件下,蛋白质分子中的肽键结构能与Cu2+结合生成紫色络合物,同时将Cu2+还原为Cu+。BCA试剂可灵敏特异的与Cu+结合,形成稳定的有颜色的络合物,562nm处有最高的吸收值,可在540-595nm测定其吸收值,颜色的深浅与蛋白质浓度成正比,与标准曲线对比
双分子荧光互补实验(BiFC)
辉骏生物双分子荧光互补实验(BiFC)简介: 将荧光蛋白分割成两个不具有荧光活性的片段,分别与待互作验证的两蛋白在目的细胞中融合表达。若待测蛋白间存在互作,则荧光蛋白的两个片段会靠近在一起展现出荧光活性,从而被检测到。 应用:体内验证两个蛋白是否存在互作。
腺病毒感染目的细胞预实验
腺病毒 感染目的细胞预实验目的: 确定腺病毒感染目的细胞的最低病毒量,各个细胞株的腺病毒转导效率都不太一样, 其中尤以淋巴细胞株最难转导。 具体实验步骤: 1. 实验前一天收集处于对数生长期,生长状态良好的目的细胞,用完全培养基稀释至 1105cells/mL,接种于96
简述原代细胞分离方法
人或动物体内(或胚胎)的组织,将其剪碎至1mm3的组织块,再采用如下方法进行原代细胞分离培养: 一、悬浮细胞的分离方法 1、将血液、羊水、胸水或腹水等悬液直接转至离心管中,1000rpm/分钟离心5分钟。 2、去掉上清,离心沉淀用无钙、镁的PBS清洗后1000rpm/分钟离心5分
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