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慢病毒实验常见问题及解决对策
Q:慢病毒对目的细胞的感染效率很低,如何提高病毒的感染效率? A:首先要保证细胞在感染之前处于良好的生长状态,提前24小时在细胞板上铺好细胞。其次可以使用易感细胞如293T进行滴度测试,检测慢病毒浓缩液滴度是否出现大幅下降。在此基础上适当提高慢病毒感染的MOI值
蛋白质与蛋白质组学
对于 蛋白质组学 的研究来说,它的最基本的实验手段就是利用 双向凝胶电泳 (two-dimensional protein electrophoresis, 2DE),在整个 基因组水平上检测蛋白质表达的情况。双向凝胶电泳首先利用等电点聚焦来分离不同等电点的蛋白,再利用SDS-PAGE来分离不同分子量的蛋白
核酸标记技术介绍
一般来说,有两种类型的核酸标记技术:放射性同位素标记和非放射性标记。 1.放射性同位素标记:被认为是一种传统的核酸标记方法,利用ATP-- 32 P or 35 P合成放射性标记的核苷酸,它们很容易被并入核酸序列,通过传统的酶法或者生物体。 放射性核苷酸于1935年首次被乔
如何成功验证mirRNA靶基因?
大家在前期调研中是否经常遇到这些问题: 1、通过各种在线软件进行预测获得 miRNA 靶向基因 ,但对 miRNA 靶基因的实际作用不清楚。 2、预测到转录因子对基因的表达起抑制或增强的作用,而具体活性以及结合位点仍然需验证。 3、未知 lncRNA 或者 circRNA 吸附 miRNA 效
双向电泳实验7大常见问题答疑
辉骏生物总结了以下7点关于双向电泳实验答疑,希望对要做双向电泳实验的同学带来帮助! Q1:凝胶的蛋白鉴定一般需要多少量的蛋白? A:现代质谱和色谱仪的检测灵敏度都是非常高的,只要肉眼能清晰可见(包括银染的点)的蛋白点都可足够进行蛋白鉴定,但是蛋白取点的
鉴定蛋白该用一级质谱Or二级质谱?
蛋白质组问题之:一级质谱和二级质谱的选择。 辉骏生物在以往实验中,遇到很多做 双向电泳 的朋友在选择2-DE的差异点做质谱的时候经常会遇到一级质谱和二级质谱的选择的问题, 常规的一级 质谱鉴定 ,指通过一次质谱测定某个蛋白所有酶解片段的精确质量信息并对库检索
肺泡上皮细胞分离方法
肺泡上皮细胞(AECs)是肺细胞的主要类型之一,可用于分析肺上皮细胞对外界因素的反应。因此,小鼠肺部的AECs可以作为疾病的体外模型。AECs对于研究肺的发育、损伤和修复是必不可少的。从事呼吸系统疾病如急性呼吸窘迫综合征(ARDS)、囊性纤维化、肺气肿和肺炎研究的人员
研究发现拖延症基因
我也不想做拖延狗,可是基因不允许啊!这句话不是开玩笑。 德国波鸿大学的Erhan Genc等人找到了影响大脑多巴胺释放的基因,该基因负责编码酪氨酸羟化酶(tyrosine hydroxylase,TH),它的表达量决定了大脑中包括多巴胺在内的各种儿茶酚胺递质的数量。 不过,TH基因似乎
腺病毒感染目的细胞预实验步骤
腺病毒 感染目的细胞预实验 实验目的:确定腺病毒感染目的细胞的最低病毒量,各个细胞株的腺病毒转导效率都不太一样, 其中尤以淋巴细胞株最难转导。 辉骏生物腺病毒感染目的细胞具体实验步骤: 1. 实验前一天收集处于对数生长期,生长状态良好的目的细胞,用完全培养
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