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siRNA载体构建实验服务

siRNA载体构建概述


RNA干扰(RNAi)是一种运用双链RNA(dsRNA)分子实现基因的沉默,在植物和动物中都广泛存在的一种基因调控机制。导入细胞内的双链RNA在Dicer酶的作用下形成21-23核甘酸长siRNA, siRNA双链结合一个核酶复合物从而形成RNA诱导沉默复合物(RNA-inducedsilencingcomplex,RISC)与mRNA结合诱导mRNA切割,从而调节基因的表达。其应用于包括功能基因组学、药物作用靶点筛选和细胞信号通路等研究中,并且逐步成为病毒性疾病、遗传性疾病以及肿瘤等的基因治疗研究的一种手段。

siRNA
图1:siRNA作用机制
 

本公司siRNA载体技术服务的基本原理就是将表达siRNA的双链DNA插入到启动子下面,导入细胞后,启动子启动siRNA的表达并在Dicer核糖核酸酶的作用下产生具有活性的siRNA。

 


目前siRNA的来源主要包括化学合成,体外转录,siRNA载体(质粒载体后病毒载体)等,siRNA载体与其他方法相比,具有以下技术优势


辉骏生物:siRNA技术优势

 


技术服务内容


1、siRNA载体的选择:本公司的siRNA载体分为质粒载体和病毒载体,同时载体上带有GFP及筛选抗性基因可供选择。
 
2、设计siRNA序列:根据目的mRNA序列设计三条siRNA序列及阴性对照序列。
 
3、模板合成:合成每条编码siRNA的单链DNA模板,退火形成DNA双链。模板链后面连接RNA PolyIII聚合酶转录终止位点,且两端分别设计酶切位点。
 
4、空载体和模板酶切,连接、转化及克隆鉴定。
 
5、siRNA载体技术服务报告提交.

 


客户提供


靶基因的mRNA序列、NCBI登陆号及所属物种等与构建siRNA载体相关的信息

 


实验服务报告内容


1、siRNA载体及含该质粒的细菌各一份;
 
2、载体图谱、测序结果各一份;
  
3、siRNA载体技术服务所需试剂耗材、仪器设备、操作过程各一份;

 

实验服务周期及收费标准


咨询本公司QQ/电话:400 699 1663

 

质量承诺


保证构建的siRNA载体沉默效率大于70%

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