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蛋白质组学综合技术服务


蛋白质组学技术服务主要内容
一、MALDI-TOF/TOF质谱鉴定实验技术服务
一级、二级质谱联用鉴定蛋白质,主要用于单一蛋白或简单混合物鉴定。
二、shotgun LC-MS  质谱鉴定实验技术服务
蛋白质混合物经过液相分离与质谱联用鉴定,一次可鉴定数十至数百种蛋白质。
三、双向电泳
实验技术服务
经典蛋白质组学技术,24cm大胶分离,分辨率更高,能分离任何蛋白质样本。
四、DIGE
实验技术服务
双向电泳的进一步升级,采用荧光标记,引入内标匹配与校正,定量更加精确。
五、iTRAQ
 实验技术服务
iTRAQ试剂体外标记后液质联用鉴定蛋白质,且同时分析蛋白质表达差异,可高通量分析。
六、SILAC
实验技术服务
体内标记技术,细胞在传代培养过程中标记同位素氨基酸,标记率达100%,减少实验误差,定量更加精确。
七、2D western blot
实验技术服务
蛋白质经过双向电泳分离后,进行western blot检测,可用于翻译后修饰研究、寻找优势抗原等。
八、生物信息分析服务
提供蛋白质组学相关的生物信息学分析
 

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一、蛋白质质谱鉴定实验技术服务:
   技术简介:蛋白质被胰酶酶切后形成肽段混合物,经质谱仪得到质谱峰图,通过与数据库中的理论质谱峰图进行比对,同时以打分的形式评判鉴定结果,当打分大于某个阈值时,即判定质谱鉴定成功,反之则鉴定失败。
   服务优势:本公司目前已成功鉴定20000个以上的蛋白质质谱,包含数十个物种,如人、鼠、兔、鸡、猪、水稻、棉花、大麦、葡萄、香蕉、杨树、血吸虫、弓形虫、线虫、蓝藻、大肠杆菌、嗜血流感菌、衣原体等等;涉及多种形式蛋白质样本,如双向电泳斑点、蛋白质溶液、条带、干粉等。本公司承诺没有鉴定成功的蛋白质不收取任何服务费用。
   技术咨询:MALDI-TOF/TOF服务详情请登录:http://www.fitgene.com/ 热线:400-699-1663

二、shotgun LC-MS 质谱鉴定实验技术服务
    技术简介:蛋白混合物酶切后的肽段,经高效液相色谱分离,在线或离线导入高分辨率质谱仪。质谱仪能有效破碎各肽段,并采集足够的二级质谱信息。优质的检索软件能利用二级质谱信息检索出对应的肽段序列,然后拼接成混合物中各蛋白质的完整序列。由于是在二级质谱水平上鉴定蛋白质,shotgun能很好的鉴定混合物;同时这种技术也是构成iTRAQ和SILAC技术的基础。
    服务优势:本公司目前在shotgun蛋白质混合物鉴定实验技术方面已积累多年经验,已经成功鉴定数千例蛋白质混合物样本,可分析多种形式的蛋白质样本,如蛋白质条带、组织提取液、全细胞裂解液、亚细胞分级组分等。涉及多个物种,如动物组织样本、细胞样本、植物样本等。在此技术基础上提供的iTRAQ和SILAC数据已发表在蛋白质组学专业期刊上。
    技术咨询:shotgun LC-MS服务详情请登录:http://www.fitgene.com/ 热线:400-699-1663

三、双向电泳实验技术服务
    技术简介:双向电泳可以从细胞、组织或其它生物样本中分离数千种蛋白质,凝胶上的斑点都对应着样品中的蛋白质,且各种蛋白质的等电点、分子量和相对含量的信息都能通过质谱鉴定和软件分析获得。因此其在蛋白质组分析、疾病标志物检测、细胞差异分析、药物开发、癌症研究等领域都得到了广泛的应用。


 

   
    双向电泳技术特点:
    (1)经典方法、应用范围广、适用于各类材料;
    (2)相对iTRAQ和SILAC而言,经济实惠,可大规模多个样本筛选和分析。
    服务优势:本公司已成功为各地科研单完成超过3000张双向凝胶电泳和20000个蛋白质质谱鉴定。涉及样本包括动物组织、植物组织、各类细胞、细菌、真菌,藻类,病毒,微生物分泌蛋白等。本公司可承接各种样本的双向电泳实验及后续服务,承诺每类样本先做好样板凝胶后再收取预付款。
    技术咨询:双向电泳实验技术服务请登录:http://www.fitgene.com/ 服务热线:400-699-1663

四、荧光差异凝胶电泳(DIGE)实验技术服务
    技术简介:DIGE即荧光差异凝胶电泳,用荧光染料(Cy2, Cy3, Cy5)将蛋白质标记上,标记后蛋白质的等电点和分子量基本不受影响,等量混合标记好的蛋白质后进行双向电泳,蛋白质表达量的变化即可通过不同荧光的强度来体现。由于引入了Cy2作为内参,使得在定量效果方面大大强于传统双向电泳。

 

    DIGE技术特点:
    (1)定量精确, 采用内标而消除了胶与胶之间的实验误差;
    (2)检测动态范围更大;
    (3)同一张凝胶上可以电泳两个样品,减轻了工作量;
    (4)ImageMaster7.0(DIGE)软件可以得到统计学可信的结果,降低了操作者之间的偏差。
    服务优势:本公司已成功为各地科研单完成超过3000张双向凝胶电泳和20000个蛋白质质谱鉴定。涉及样本包括动物组织、植物组织、各类细胞、细菌、真菌,藻类,病毒,微生物分泌蛋白等。
    技术咨询:DIGE实验技术服务详情请登录:http://www.fitgene.com/ 热线:400-699-1663

五、iTRAQ实验技术服务
    技术简介:iTRAQ是一组能标记多肽N末端和赖氨酸侧链氨基的同位素试剂。在二级质谱前,每种iTRAQ标记的同一蛋白质表现为相同的理化性质和质荷比,保证了样本间的实验均一性。 而在二级质谱中,不同样本来源的信号离子表现为不同质荷比(113-119,121)的峰,因此可以根据波峰的高度及面积,分析出不同处理的蛋白定量信息。

 
 


    iTRAQ技术特点:
   (1)灵敏度高,检测限低,可检测出低丰度蛋白;
   (2)分离能力强,分析范围广,iTRAQ可以对任何类型的蛋白质进行鉴定,包括高分子量蛋白质、酸性蛋白和碱性蛋白,膜蛋白和不溶性蛋白。
   (3)能同时对8个样本进行分析,相对于SILAC而言,提高了实验通量,可同时对多个时间点或不同处理的蛋白质进行分析;
   (4)结果可靠:定性与定量分析结果更加可靠;
   (5)自动化程度高:液相与质谱连用,自动化操作,分析速度快。
    服务优势:公司在液相途径的蛋白质组学方面具有强大的实力和丰富的经验。iTRAQ标记样本后通过液相分离与质谱连用,实现高通量的蛋白质定量分析。
    技术咨询:iTRAQ实验技术服务详情请登录:http://www.fitgene.com/ 服务热线:400-699-1663

六、SILAC实验技术服务
    简介:SILAC即细胞培养条件下稳定同位素标记技术(Stable isotope labeling with amino acids in cell culture,SILAC),其基本原理是采用含有轻、中、重型同位素必需氨基酸的培养基培养细胞,同位素氨基酸被嵌入新合成的蛋白质。经5-6代培养后,蛋白质将被同位素完全标记上,等量混合后经过SDS-PAGE分离和质谱鉴定,便能鉴定出蛋白种类,同时能根据同位素峰型得到定量信息。 


 


  SILAC技术特点:
    (1)高效性:SILAC是体内标记技术,标记效率可高达100%;
    (2)定量精确:细胞收集后便可混合不同处理的样本,彻底消除实验误差,定量可靠性甚至优于iTRAQ技术;
    (3)高通量、灵敏度高:可同时鉴定并定量数百至数千种蛋白质,且检可测测到纳克级水平;
    (4)相容性:可以对多种在DMEM或RPMI 1640培养基中能够培养的细胞或细菌中表达的蛋白进行标记;
    (5)灵活性:在缺乏L-赖氨酸和L-精氨酸的培养基中添加同位素标记的这两种氨基酸,操作方便。
    服务优势:公司在SILAC蛋白质组学服务方面具有多年经验,其中有顾客在蛋白质组学权威期刊J.Proteome Res.上发表的主体数据为本公司提供。
    技术咨询:SILAC实验技术服务详情请登录:http://www.fitgene.com/ 热线:400-699-1663

七、2D western blot实验技术服务
    技术简介:2D-WB是双向电泳与传统western blot结合而成的一项技术。一般实验流程为抗原蛋白混合物先经双向电泳分离,然后将凝胶蛋白转印至支持膜上,再通过抗体杂交显色。2D-WB技术可以检测到抗原等电点或分子量发生的微小变化,在蛋白翻译后修饰的研究中有很好的应用;而2D-WB结合质谱鉴定技术,可以从蛋白混合物中找到免疫原性更强的抗原。
 

 

    服务优势:本公司可提供最大面积为17x17cm的2D-western blot技术服务,分辨率足以检测到单个位点磷酸化引起的等电点变化;或展示细胞组分蛋白抗原。
    技术咨询:2D-WB实验技术服务详情请登录:http://www.fitgene.com/ 服务热线:400-699-1663

八、生物信息学分析服务

 

 

     本公司提供蛋白质组学相关的各类生物信息学分析,如蛋白质注释、GO聚类分析、蛋白质相互作用网络构建、KEGG pathway分析等,分析服务案例已在蛋白质组学专业杂志J.Proteome Res上发表。

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