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蛋白质磷酸化位点质谱鉴定服务

蛋白质磷酸化位点鉴定概述


蛋白质磷酸化位点鉴定最常用的是多级质谱法,蛋白质经酶切消化后,用固相金属亲和吸附(IMAC)富集磷酸化肽段,通过一级质谱可发现与肽段理论值相差80Da(HPO3=80)的质谱峰,选取该峰进行二级质谱,肽段破碎过程中如果有98Da的中性丢失(H3PO4=98Da),则可确定发生了磷酸化。二级质谱同时可测定中性丢失的位点,即磷酸化位点。因此,用质谱鉴定磷酸化蛋白,不但可以知道蛋白是否磷酸化,而且可以确定磷酸化的位点。



技术服务优势


1、与传统的western鉴定磷酸化相比,通过质谱鉴定蛋白质的磷酸化位点可以定位到某个氨基酸;

  
2、可以鉴定混合物中磷酸化位点。

 



蛋白质磷酸化位点质谱鉴定技术服务流程


1、磷酸化蛋白质样品的制备:利用磷酸化抗体免疫共沉淀沉淀磷酸化蛋白质、IMAC纯化磷酸化蛋白质、表达和纯化磷酸化蛋白质等方法;

  
2、蛋白质的分离:纯化后的磷酸化蛋白质经过凝胶电泳分离后,割取磷酸化蛋白质条带后用胰蛋白酶酶切;
 
3、磷酸化位点的鉴定:质谱鉴定磷酸化位点;
 
4、实验报告提交。

 


技术服务内容


1、磷酸化化蛋白质的分离、纯化、割取和酶切;


2、质谱分析、数据库检索;
 
3、提交质谱鉴定蛋白质磷酸化位点实验报告。

 


顾客提供


1、纯化后的磷酸化蛋白质;


2、单一蛋白质鉴定磷酸化位点需提供蛋白质相关背景信息,如NCBI登录号等。

 


实验报告内容


1、质谱鉴定蛋白质磷酸化位点的原始数据及分析结果;


2、实验技术服务所需试剂耗材、仪器设备、实验方法各一份。

 


实验周期及收费标准


咨询本公司QQ/电话:400 699 1663

 

质量承诺


确保鉴定出的磷酸化位点定位到氨基酸。
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