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SILAC标记定量

技术简介

SILAC(Stable isotope labeling with amino acids in cell culture)是一种细胞培养条件下的稳定同位素标记技术,其检测原理是:利用含轻、中或重型同位素标记的必需氨基酸(主要是Lys和Arg)培养基培养细胞,标记细胞内新合成的蛋白质,培养7代以上,细胞中几乎所有蛋白质都被标记。不同处理的蛋白样品等量混合,经胰酶酶解和LC-MS/MS分析即可得到肽段及蛋白的定性和相对定量结果。
   

技术流程


 
 
仪器设备


Thermo Scientific Q Exactive HF-X
•Thermo Scientific Orbitrap Fusion Lumos
•Thermo Scientific Q Exactive
 

技术优势


1/标记效率高:非放射性同位素氨基酸对细胞蛋白质进行体内标记,标记效率几乎可达100%;
2/定量准确性极高:各组蛋白标记混合,酶解和检测均在同一管中进行,避免了操作误差;
3/灵敏度高:采用高分辨率的质谱仪检测,低丰度蛋白也能检出。

 
应用范围


基础医学:疾病标志物,发病机制,疾病分型等;
生物医药:药物机理,药效评价,药物开发等。
 

服务信息

项目名称 客户提供 结果交付 实验周期
SILAC       已培养7代以上的SILAC标记细胞(同位素培养基由我方提供;如委托我方培养细胞,额外收费)  
样本信息表
标记测试结果
蛋白鉴定及定量结果表
肽段鉴定及定量结果表   
差异蛋白结果表
生物信息学分析结果
质谱原始数据
实验报告
8-10周       
 
 
参考文献


1.Discovery of the Oncogenic Parp1, a Target of bcr-abl and a Potential Therapeutic, in mir-181a/PPFIA1 Signaling Pathway. Mol Ther-Nucl Acids. 2019.【客户文章】
2.Quantitative Proteomics by Amino Acid Labeling in Foot-and-Mouth Disease Virus (FMDV)-Infected Cells. J Proteome Res. 2013.【客户文章】
3.Quantitative Proteomics Using Stable Isotope Labeling with Amino Acids in Cell Culture Reveals Protein and Pathway Regulation in Porcine Circovirus Type 2 Infected PK-15 Cells. J Proteome Res. 2011.【客户文章】

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