SILAC标记定量

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SILAC标记定量

技术简介

SILAC(Stable isotope labeling with amino acids in cell culture)是一种细胞培养条件下的稳定同位素标记技术，其检测原理是：利用含轻、中或重型同位素标记的必需氨基酸（主要是Lys和Arg）培养基培养细胞，标记细胞内新合成的蛋白质，培养7代以上，细胞中几乎所有蛋白质都被标记。不同处理的蛋白样品等量混合，经胰酶酶解和LC-MS/MS分析即可得到肽段及蛋白的定性和相对定量结果。

技术流程

仪器设备

•Thermo Scientific Q Exactive HF-X
•Thermo Scientific Orbitrap Fusion Lumos
•Thermo Scientific Q Exactive

技术优势

1/标记效率高：非放射性同位素氨基酸对细胞蛋白质进行体内标记，标记效率几乎可达100%；
2/定量准确性极高：各组蛋白标记混合，酶解和检测均在同一管中进行，避免了操作误差；
3/灵敏度高：采用高分辨率的质谱仪检测，低丰度蛋白也能检出。

应用范围

►基础医学：疾病标志物，发病机制，疾病分型等；
►生物医药：药物机理，药效评价，药物开发等。

服务信息

项目名称	客户提供	结果交付	实验周期
SILAC	已培养7代以上的SILAC标记细胞（同位素培养基由我方提供；如委托我方培养细胞，额外收费）样本信息表	标记测试结果蛋白鉴定及定量结果表肽段鉴定及定量结果表差异蛋白结果表生物信息学分析结果质谱原始数据实验报告	8-10周

参考文献

1.Discovery of the Oncogenic Parp1, a Target of bcr-abl and a Potential Therapeutic, in mir-181a/PPFIA1 Signaling Pathway. Mol Ther-Nucl Acids. 2019.【客户文章】
2.Quantitative Proteomics by Amino Acid Labeling in Foot-and-Mouth Disease Virus (FMDV)-Infected Cells. J Proteome Res. 2013.【客户文章】
3.Quantitative Proteomics Using Stable Isotope Labeling with Amino Acids in Cell Culture Reveals Protein and Pathway Regulation in Porcine Circovirus Type 2 Infected PK-15 Cells. J Proteome Res. 2011.【客户文章】

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