技术简介 SILAC(Stable isotope labeling with amino acids in cell culture)是一种细胞培养条件下的稳定同位素标记技术,其检测原理是:利用含轻、中或重型同位素标记的必需氨基酸(主要是Lys和Arg)培养基培养细胞,标记细胞内新合成的蛋白质,培养7代以上,细胞中几乎所有蛋白质都被标记。不同处理的蛋白样品等量混合,经胰酶酶解和LC-MS/MS分析即可得到肽段及蛋白的定性和相对定量结果。 技术流程 ![]() 仪器设备 •Thermo Scientific Q Exactive HF-X •Thermo Scientific Orbitrap Fusion Lumos •Thermo Scientific Q Exactive 技术优势 1/标记效率高:非放射性同位素氨基酸对细胞蛋白质进行体内标记,标记效率几乎可达100%; 2/定量准确性极高:各组蛋白标记混合,酶解和检测均在同一管中进行,避免了操作误差; 3/灵敏度高:采用高分辨率的质谱仪检测,低丰度蛋白也能检出。 应用范围 ►基础医学:疾病标志物,发病机制,疾病分型等; ►生物医药:药物机理,药效评价,药物开发等。 服务信息
参考文献
1.Discovery of the Oncogenic Parp1, a Target of bcr-abl and a Potential Therapeutic, in mir-181a/PPFIA1 Signaling Pathway. Mol Ther-Nucl Acids. 2019.【客户文章】 |