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DIGE(2D-DIGE)实验技术服务

DIGE概述


DIGE(双向荧光差异凝胶电泳,Two-dimensional fluorescence difference in gel electrophoresis,2D-DIGE),是由传统双向电泳发展而来的新型蛋白质组定量技术,其分离蛋白的基本过程与传统双向电泳相同,主要利用蛋白质的等电点和分子量差异来分离蛋白质混合物。DIGE用三种荧光染料(Cy2, Cy3和Cy5)分别标记不同组别的蛋白,通常情况下,Cy3和Cy5分别标记对照组和实验组的蛋白,而Cy2标记对照组和实验组蛋白的混合物,作为内参使用。之后将三种标记的蛋白样品等量混合,在一张凝胶上进行双向电泳,电泳完凝胶用不同波长的激光扫描,即可得到三组标记蛋白蛋在同一张凝胶中的扫描图。胶图经专业软件分析对比,便可得到准确的定量信息。



与传统双向电泳(银染或考染胶)相比,DIGE有以下优势 


1、灵敏度高,可检测低至125 pg的蛋白质;

2、高效,同一块凝胶上可以检测两个混合样品的蛋白表达情况,简化了实验流程,减少了操作误差;

3、线性范围更广,动态范围高达10-5;

4、定量更精确,内标消除了凝胶与凝胶之间的实验误差,显著提高了结果的精确度和可重复性。

5、统计学分析,ImageMaster7.0(DIGE)软件自动分析,得到统计结果,降低了人为分析偏差。



DIGE技术服务流程


DIGE(2D-DIGE),荧光定量蛋白质组学,技术服务
图1:DIGE技术服务流程
 

对照组和实验组蛋白样品分别用Cy3和Cy5标记,同时将实验组与对照组的样品等量混合用Cy2标记,作为内标。之后等量混合三种荧光标记的蛋白样品,用2D-PAGE电泳分离,凝胶经荧光扫描后,用ImageMaster 7.0(DIGE)软件分析同一蛋白质在不同样品中的表达差异。
 


DIGE技术服务内容


辉骏生物:DIGE技术服务内容


送样须知


样本应避免各类污染和反复冻融,妥善保存,用液氮或干冰保存寄送;广州本地客户可上门收样。

注:DIGE荧光染料可标记多种类型的蛋白样本,如组织、细胞、细菌等材料,但不同类型的样本其蛋白需求量有所不同,具体请咨询我司。

 


实验服务报告内容


DIGE实验服务报告内容

 


DIGE实验服务案例


辉骏生物DIGE实验服务案例
 

 图2:DIGE定量分析结果


蛋白质样品经过荧光染料标记后双向电泳,ImageMaster7.0 (DIGE)分析差异点结果。

 


实验服务周期及收费标准


咨询本公司:400 699 1663
 


质量承诺


1、Cy2作为内标,确保定量的准确;

2、提供客观的DIGE实验分析结果。
 

欢迎索取顾客在辉骏生物做的DIGE技术服务所发表的样板文章。
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