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串联亲和纯化TAP-MS

串联亲和纯化(tandem afifnity purification,TAP)是研究体内蛋白质相互作用的新技术,经过两步特异性的亲和纯化,可得到生理条件下与诱饵蛋白质存在相互作用的蛋白质。


TAP-MS技术原理

在诱饵蛋白的一侧同时引入两个标签(3*flag和TST),采用慢病毒系统使该融合蛋白在细胞中稳定表达;收集细胞并裂解,分别采用两个标签的纯化系统进行两步纯化,从而更有效的去除非特异结合的蛋白,产物经LC-MS/MS鉴定及数据分析可得到诱饵蛋白的互作蛋白。

TAP-MS技术原理-辉骏生物.png


TAP-MS技术实验流程
TAP-MS技术流程.png
辉骏生物技术优势

1. 筛选到的互作蛋白是体内与诱饵蛋白天然结合的,更接近体内生理情况;

2. 经两步纯化,能有效去除非特异结合蛋白,阳性率高。

 

TAP MS应用范围

寻找诱饵蛋白的互作蛋白,较适用于研究背景不清楚的诱饵蛋白。

TAP MS服务信息 

项目名称

客户提供

结果交付

实验周期

 



TAP MS

细胞样本
诱饵蛋白编码区基因模板
实验信息表

1、诱饵蛋白的双标签慢病毒表达载体
2、诱饵蛋白WB检测图
3、质谱检测结果
4、生物信息学分析结果
5、实验报告

 



14-16周


串联亲和纯化—客户发表文献

1. Protein target identification of ginsenosides in skeletal muscle tissues: discovery of natural small-molecule activators of muscle-type creatine kinase. J Ginseng Res. (2020 , IF=5.487).

2. Cholesterol induces epithelial-to-mesenchymal transition of prostate cancer cells by 3 suppressing degradation of EGFR through APMAP. cancer research. (2019 , IF=9.727).


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