GST pull down原理
先将体外表达的GST融合蛋白结合到谷胱甘肽Beads上,再将靶蛋白-GST-Beads和细胞裂解液孵育,这样互作蛋白便一起吸附在Beads上。洗涤掉未结合的蛋白后,再用洗脱液将互作蛋白复合物从Beads洗脱下来,即GST pulldown产物。这种互作复合物既可以用WesternBlot检测已知蛋白,也可以用质谱鉴定出未知蛋白。
GST pull down应用
筛选或验证和靶蛋白的互作蛋白。
GST pull down实验流程

几种互作蛋白实验特点
1. GST pulldown:体外表达诱饵蛋白,适合无IP级别抗体、又不易转基因的情况;
2. AP-MS:体内表达带标签的诱饵蛋白,适合无IP级别抗体、但易转基因的情况;
3. TAP-MS:体内表达带双标签的诱饵蛋白,适合无IP级别抗体、但易转基因的情况;
4. CoIP:原汁原味的体内蛋白复合物分离,适合于有非常好的IP级别抗体的情况;
5. SILAC-IP:可定量鉴定分析体内蛋白复合物,适合于可传代细胞,尤其是易转基因细胞。
GST pull down服务优势
1. 近十年服务经验,众多服务案例,服务成果获得期刊认可;
2. 对蛋白互作的筛选鉴定理解深刻,擅长针对客户情况提出合适的方案建议;
3. 自有蛋白质组学平台,对微量互作蛋白的质谱鉴定有十足的把控能力,对后续的生物信息分析有独到的见解;
4. 售后技术支持将一直保持到客户发表文章,确保客户安心进行下游实验及投稿。
GST pull down服务信息
项目名称 | 客户提供 | 结果交付 | 实验周期 |
GST pull down | 实验样本 诱饵蛋白的GST原核表达载体 待测蛋白抗体 实验信息表
| 1、诱饵蛋白WB检测图 2、待测蛋白WB检测图 3、结果整理图 4、实验报告
| 3-4周
|
GST pull down MS | 实验样本 诱饵蛋白的GST原核表达载体 实验信息表 | 1、诱饵蛋白WB检测图 2、质谱检测结果 3、生物信息学分析结果 4、实验报告 | 6-7周 |
GST Pull-down—客户发表文献
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