科研服务

Research Service

GST pull down

GST pull down原理
先将体外表达的GST融合蛋白结合到谷胱甘肽Beads上,再将靶蛋白-GST-Beads和细胞裂解液孵育,这样互作蛋白便一起吸附在Beads上。洗涤掉未结合的蛋白后,再用洗脱液将互作蛋白复合物从Beads洗脱下来,即GST pulldown产物。这种互作复合物既可以用WesternBlot检测已知蛋白,也可以用质谱鉴定出未知蛋白。

GST pull down技术原理-辉骏生物.jpg


GST pull down应用

筛选或验证和靶蛋白的互作蛋白。


GST pull down实验流程

GST Pull-down技术流程-辉骏生物.png


几种互作蛋白实验特点

1. GST pulldown:体外表达诱饵蛋白,适合无IP级别抗体、又不易转基因的情况;

2. AP-MS:体内表达带标签的诱饵蛋白,适合无IP级别抗体、但易转基因的情况;

3. TAP-MS:体内表达带双标签的诱饵蛋白,适合无IP级别抗体、但易转基因的情况;

4. CoIP:原汁原味的体内蛋白复合物分离,适合于有非常好的IP级别抗体的情况;

5. SILAC-IP:可定量鉴定分析体内蛋白复合物,适合于可传代细胞,尤其是易转基因细胞。


GST pull down
服务优势

1. 近十年服务经验,众多服务案例,服务成果获得期刊认可;

2. 对蛋白互作的筛选鉴定理解深刻,擅长针对客户情况提出合适的方案建议;

3. 自有蛋白质组学平台,对微量互作蛋白的质谱鉴定有十足的把控能力,对后续的生物信息分析有独到的见解;

4. 售后技术支持将一直保持到客户发表文章,确保客户安心进行下游实验及投稿。


GST pull down服务信息

项目名称

客户提供

结果交付

实验周期

 


GST pull down

实验样本
诱饵蛋白的GST原核表达载体
待测蛋白抗体
实验信息表

1、诱饵蛋白WB检测图
2、待测蛋白WB检测图
3、结果整理图
4、实验报告

 


3-4周

GST pull down MS实验样本
诱饵蛋白的GST原核表达载体
实验信息表

1、诱饵蛋白WB检测图
2、质谱检测结果
3、生物信息学分析结果
4、实验报告

6-7周


GST Pull-down—客户发表文献

1. Chen S.L. et al: A GYS2/p53 Negative Feedback Loop Restricts Tumor Growth in HBV-Related Hepatocellular Carcinoma. Cancer Research ( 2019,IF=9.727 ).


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