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稳定细胞系构建

稳定细胞系构建是在细胞水平上实现基因稳定过表达或干扰的一项技术。

 

稳定细胞系构建技术原理

将外源DNA通过质粒转染或病毒感染的方法,整合到宿主细胞染色体上,使宿主细胞长期表达目的基因及蛋白。当带有外源基因的质粒或慢病毒转入细胞后,可以根据载体中所含有的抗性标志选用相应的药物进行细胞传代,从而得到可稳定表达/沉默目的基因的细胞系。最常用的抗性筛选标志物有新霉素(neomycin)、潮霉素(hygromycin)和嘌呤霉素(puromycin),常用G418来代替新霉素进行选择性筛选。


稳定细胞系构建技术实验流程
稳定细胞系构建技术流程-辉骏生物.png

辉骏生物技术优势

1.外源基因表达水平高,表达稳定;可以稳定、长期的研究目的基因及其表达蛋白在某种细胞中的功能。

2.由于慢病毒感染率较高且能将外源基因稳定整合入宿主细胞基因组中,因此用该方法构建稳定细胞系比质粒转染法周期更短,且成功率更高。

 

稳定细胞系构建应用范围

过表达/干扰目的基因的稳定细胞株构建,用于稳定、长期的研究目的基因及其表达蛋白在某种细胞中的功能。

 

稳定细胞系构建服务信息

项目名称

客户提供

结果交付

实验周期

稳定细胞系构建目的基因序列
待构建细胞系
实验信息表(包括实验要求,细胞培养信息等)

1、稳定表达外源基因的细胞系及对照细胞系,各3管(冻存管)
2、慢病毒载体质粒约3ug
3、慢病毒载体甘油菌约1ml
4、实验报告

3-3.5个月


稳定细胞系构建-客户文章

1.Pharmacological Properties of the Type 1 Tyramine Receptor in the Diamondback Moth, Plutella xylostella. Int J Mol Sci. 2019.【客户文章】

2.FAM3B promotes progression of oesophageal carcinoma via regulating the AKT–MDM2–p53 signalling axis and the epithelial‐mesenchymal transition. J Cell Mol Med. 2019.【客户文章】

3.FEN1 promotes tumor progression and confers cisplatin resistance in non-small-cell lung cancer. Molecular Oncology. 2017. 【客户文章】

4.The FEN1 L209P mutation interferes with long-patch base excision repair and induces cellular transformation. Oncogene. 2016.【客户文章】

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