科研服务

Research Service

双荧光素酶检测启动子活性

双荧光素酶报告基因实验原理

荧光素底物在荧光素酶作用下会发光,且光强度能反应荧光素酶的蛋白表达量。而荧光素酶的蛋白表达量,又和启动子活性、mRNA的稳定性及翻译效率等有关。利用这个特点,将待测启动子、UTR等序列与荧光素酶ORF框融合表达,再检测其发光强度,就能判断这些序列对蛋白表达的影响。这就叫荧光素酶报告基因检测。
为了减少实验误差,一般会同时转染一个能稳定表达荧光素酶的质粒作为内参,所以叫双荧光素酶报告基因检测。

 

双荧光素酶报告基因实验流程

双荧光素酶报告基因实验技术服务_启动子活性检测实验.jpg

启动子与转录因子结合验证外包服务_转录因子验证_双荧光素酶检测.jpg

双荧光素酶检测启动子活性技术服务_双荧光素酶启动子活性检测_双荧光素酶报告基因价格.jpg 

双荧光素酶报告基因实验技术应用

1、检测启动子活性;
2、检测转录因子与目标启动子的相互作用;
3、检测miRNA对靶基因调控作用。


双荧光素酶报告基因实验*辉骏生物优势

1.近十年服务经验,众多服务案例,服务成果得到优秀期刊认可;
2.对启动子、转录因子、miRNA影响荧光素酶表达的具体机制理解深刻,对DNA-蛋白互作方面有独到见解,擅长针对客户情况提出合适的方案建议;
3.自有分子及细胞生物实验平台,能有效制定并执行最优的实验路线;
4.售后技术支持将一直保持到客户发表文章,确保客户安心进行下游实验及投稿。


双荧光素酶报告基因实验服务信息

项目名称

客户提供

结果交付

实验周期

 


启动子活性分析

细胞样本
实验信息表(待测启动子序列,细胞培养信息等)

1、报告基因载体(启动子不同截短形式)
2、双荧光素酶检测结果
3、实验报告

5-6周(不含细胞培养周期)

启动子与转录因子结合验证细胞样本
实验信息表(待测启动子序列,转录因子序列,细胞培养信息等)

1、报告基因载体(野生和突变型)
2、转录因子表达载体
3、双荧光素酶检测结果
4、实验报告


5-6周(不含细胞培养周期)


双荧光素酶报告基因实验 客户文献

1. Tang W.W. et al: The p300/YY1/miR-500a-5p/HDAC2 signalling axis regulates cell proliferation in human colorectal cancer. Nature Communications. 2019,IF = 12.121.
【研究内容】:研究发现,miR-500A-5p在CRC组织中的低表达与恶性进展相关,可促进肿瘤的生长与转移。作者通过双荧光素酶报告分析实验证明miR-500A-5P可直接靶向HDAC2,抑制HDAC2介导的裸鼠大肠癌细胞增殖;此外,YY1与miR-500A-5P的启动子结合并负调控其转录。互作实验与异种移植实验进一步表明,miR-500A-5p通过靶向p300/YY1/HDAC2轴在结直肠癌中发挥肿瘤抑制作用,为结直肠癌治疗提供新的潜在候选基因。
使用相关技术:启动子活性检测、luciferase荧光素酶检测实验


2. Hou P.F. et al: KIF4A facilitates cell proliferation via induction of p21-mediated cell cycle progression and promotes metastasis in colorectal cancer. Cell Death Dis. 2018,IF = 6.304.
【研究内容】:研究表明BRCA1缺陷型细胞的有丝分裂受到影响,存在纺锤体检查点缺陷。客户检测和纺锤体检查点密切相关的几个基因,发现BRCA1缺陷型Mad2基因表达水平变化明显,由此推测BRCA1是通过影响Mad2的表达,从而影响有丝分裂的。DNA pull down及ChIP-qPCR实验证实了BRCA1可以和Mad2启动子结合,进一步研究发现BRCA1确实上调Mad2从而影响有丝分裂。
使用相关技术:双荧光素酶检测服务、启动子活性分析实验外包


相关服务推荐
  GST pull down
★ RNA pull down
★ circRNA pull down




  • 咨询在线客服
  • 实验热线

    400-699-1663

    020-32053431

  • 二维码
  • 图标

    联系地址

    广州市黄埔区科学城广州国际企业孵化器D506

    辉骏电话 联系电话

    020-32053431 / 400-699-1663

    辉骏邮箱 电子邮箱

    service@fitgene.com

    友情链接:

     ©2011-2021 广州辉骏生物科技股份有限公司 版权所有 粤ICP备19156356号