科研服务

Research Service

SILAC标记定量

SILAC技术原理

SILAC(Stable isotope labeling with amino acids in cell culture)是一种细胞培养条件下的稳定同位素标记技术。利用含轻、中或重型同位素标记的必需氨基酸(主要是赖氨酸Lys和精氨酸Arg)培养基培养细胞,标记细胞内新合成的蛋白质,培养7代以上,细胞中几乎所有蛋白质都被标记。等量混合各类型蛋白质,酶解后进行LC-MS/MS分析,即可得到肽段及蛋白的定性和相对定量结果。

SILAC技术实验流程
silac实验外包,SILAC实验,SILAC实验技术服务.jpg
SILAC实验技术应用

1、蛋白鉴定和定量;
2、差异蛋白的筛选和鉴定。

 

SILAC实验*辉骏服务优势

1.近十年服务经验,众多服务案例,服务成果得到优秀期刊认可;

2.对蛋白筛选与定量方面有独到见解,擅长针对客户情况提出合适的方案建议;

3.自有分子及细胞生物实验平台,能有效制定并执行最优的实验路线;

4.售后技术支持将一直保持到客户发表文章,确保客户安心进行下游实验及投稿。

SILAC技术实验服务信息

项目名称

客户提供

结果交付

实验周期

 



SILAC


已培养7代以上的SILAC标记细胞(同位素培养基由我方提供;如委托我方培养细胞,额外收费)


样本信息表


1、标记测试结果
2、蛋白鉴定及定量结果表
3、肽段鉴定及定量结果表
4、差异蛋白结果表
5、生物信息学分析结果
6、质谱原始数据
7、实验报告

 



8-10周


SILAC实验 客户文献

1. Gu C.M. et al: Discovery of the Oncogenic Parp1, a Target of bcr-abl and a Potential Therapeutic, in mir-181a/PPFIA1 Signaling Pathway. Molecular Therapy: Nucleic Acids. 2019,IF= 5.66.
【研究内容】:miR-181a在白血病特别是慢性粒细胞白血病(CML)中表达下调,并影响疾病发展、耐药性和预后,但其靶基因的分子机制尚不清楚。该文章通过基因芯片,SILAC蛋白组学等方法联合分析,发现PPFIA1是miR-181a的直接靶基因。CoIP-MS等后续实验发现,PARP1会结合PPFIA1,抑制PPFIA1或PARP1能够下调c-KIT水平,抑制CML细胞生长,并延长小鼠存活期。研究揭示PPFIA1和PARP1或成为潜在的CML治疗靶点。
使用技术:稳定同位素标记(SILAC)蛋白质组学实验、silac蛋白组、silac标记定量实验服务

2. Guo, H.C. et al: Quantitative Proteomic Analysis of BHK-21 Cells Infected with Foot-and-Mouth Disease Virus Serotype Asia 1. PLoS ONE. 2015,IF=3.569.
【研究内容】:研究者通过稳定同位素标记技术(SILAC)定量研究了亚洲1型口蹄疫病毒(FMDV)感染BHK-21细胞后宿主细胞基因表达的变化,从结果中选择6个变化显著的蛋白(其中VPS28、PKR、EVI5为下调,LYPLA1、SEC62和DARS为上调)做进一步研究。Western blot、RT-PCR等试验验证了这些蛋白在口蹄疫病毒复制过程中的功能重要性,提示口蹄疫病毒感染可能通过影响细胞特异性蛋白的表达,为口蹄疫病毒感染创造更有利的条件。
使用技术:SILAC蛋白质组学分析、SILAC实验、silac蛋白组检测外包

3. Fan, H. et al. Quantitative proteomics using stable isotope labeling with amino acids in cell culture reveals protein and pathway regulation in porcine circovirus type 2 infected PK-15 cells. J Proteome Res. 2012,IF=4.564.
【研究内容】:猪圆环病毒2型(PCV2)是引起猪圆环病毒病(PCVD)的主要病原。为揭示PCV2的致病机制和病毒与宿主的相互作用,研究者采用稳定同位素标记(SILAC)结合LC-−MS/MS技术,对PCV2感染的PK-15细胞进行了定量蛋白质组学研究,并构建了PCV2感染的PK-15细胞的蛋白质调控网络。研究有助于理解PCV2感染的致病机制和宿主细胞的分子反应,为预防PCV2感染提供新的方法。
使用技术:质谱 silac实验、silac实验服务


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